中药地龙和线叶旋覆花的化学成分及活性研究

来源 :广东药科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:utpaxiao
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背景参环毛蚓(Pheretima aspergillum(E.Perrier))为钜蚓科(Megascolecidae)环毛蚓属(Pheretima)动物,在中药中以其干燥全体入药,俗称“广地龙”,与“沪地龙”一起统称地龙。地龙中含有多种天然活性物质,主要有脂肪酸类、甾体类、氨基酸类、核苷类以及呋喃磺酸类等。其药理活性广泛,具有显著的抗凝血、抗血栓、平喘和促创面愈合等作用。作为我国传统中药,地龙入药已有上千年历史,但对其中的化学成分很少有系统的研究,多数为利用分析仪器来推测其可能含有的化学成分。如呋喃磺酸类化合物在首次被发现后,并没有再分离得到同类型结构,而是利用UPLC-MS分析从而推测地龙体内含有该系列化合物。为了分离得到更多的呋喃磺酸类化合物,对地龙进行进一步的研究。线叶旋覆花(Inula lineariifolia)为菊科(Asteraceae)旋覆花属(Inula)多年生草本植物,在中药中以其干燥的头状花序入药,又被称为“金沸草”。主要分布于我国北部、东北部地区。旋覆花属植物富含萜类化合物,其结构多样且在抗炎、抗肿瘤等方面具有良好的生物活性。在前期研究中,已从线叶旋覆花中分离得到了多个结构新颖的倍半萜内酯二聚体。为寻找更多结构新颖的活性萜类化合物,对线叶旋覆花中天然活性物质进行进一步的完善。方法本论文采用LC-MS进行追踪,以薄层色谱法,硫酸-香草醛显色为指导,综合利用薄层层析硅胶、Sephadex LH-20凝胶、C18反相硅胶和HPLC半制备等分离手段,以及核磁共振、高分辩质谱、低分辨质谱、红外、紫外、圆二色谱和旋光等多种鉴定技术,对两种中药材进行化学成分的分离鉴定。同时,通过酶标仪法测定抗血小板聚集率,CCK-8法测定细胞毒性,Griess法测定NO含量,从而对部分新化合物进行初步的生物活性研究。结果针对于动物药材地龙,从中分离鉴定出13个化合物,包括呋喃磺酸类10个、甾体类1个、脂肪酸类1个和核苷类1个。其中新化合物均为呋喃磺酸类化合物(Pha-2~10),结构类型是以2-己基-5-乙基-3-呋喃磺酸(Pha-1)为基本骨架,基团取代位置发生在骨架上。对部分呋喃磺酸类化合物进行抗血小板聚集的生物活性研究,结果显示:Pha-3和Pha-4都具有一定的抗血小板聚集活性,且Pha-4的抑制作用呈浓度依赖性,浓度越低抗血小板聚集作用越弱。针对于植物药材线叶旋覆花,从中分离鉴定出11个化合物,包括5个倍半萜内酯二聚体、1个二萜和5个倍半萜内酯。其中3个为稀有的新倍半萜内酯二聚体(IL-1~3),通过C-13/C-1’和C-11/C-3’两个C-C单键链接而成。对所分离得到的IL-1~3进行抗炎生物活性研究,结果表明:化合物IL-1~3对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞的NO生成具有显著的抑制作用(IC50值分别为1.421、1.087和1.243μM),且对RAW 264.7巨噬细胞没有明显的细胞毒活性(IC50>50)。结论本论文对动物药材地龙及植物药材线叶旋覆花的化学成分及活性进行研究,不仅为二者有效部位的发现奠定了基础,同时也为抗血小板聚集类药物及抗炎药物的设计提供了研究方向,具有一定的科研价值与意义。
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