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根腐病是蓝莓(Vaccinium uliginosum Linn.)栽培过程中危害最为严重的病害之一,严重制约着贵州省蓝莓产业的发展。传统的化学防治存在破坏自然界生态平衡、对环境造成严重污染,使病原菌容易产生抗药性等弊端。因此,寻找更有效的绿色防治方法具有重要意义。生物防治具有针对性强、不杀伤天敌和有益微生物,能够保护环境生态平衡,防治持久高效且病原菌不易产生抗药性等特点,已经成为林业可持续发展中重要的组成部分。本研究为明确贵州省蓝莓根腐病的致病菌,筛选对蓝莓根腐病具有抑制作用的生防真菌,对根腐病致病菌进行分离、鉴定,分离健康蓝莓根际土壤真菌和内生真菌,并对其生防潜能进行评价,研究生防真菌对蓝莓根腐病的生防机理,利用盆栽试验进一步探索生防真菌的生防效果。研究得到以下结果,研究结果可为贵州省蓝莓根腐病的防治提供理论依据。(1)本研究采集蓝莓根腐病病株样本,通过组织分离法获得致病菌,结合形态学和ITS、EF-1α和β-tubline多基因测序结果对致病菌进行鉴定,最终明确了贵州省主要蓝莓栽培基地蓝莓根腐病的致病菌为尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)和F.commune,对蓝莓幼苗均具有较高的致病性,其中菌株LMGF6(F.commune)和LMGF7(F.oxysporum)致病性最强。(2)本研究通过平板对峙试验,从152株蓝莓内生真菌或根际土壤真菌,筛选出11株对蓝莓根腐病致病菌具有显著抑制作用的生防菌株,对致病菌LMGF6的抑制率大小为:TM11(68.01%)>M1(64.94%)>M3(64.91%)>M2(63.66%)>MG6(59.35%)>MG5(57.58%)>G14(57.53%)>G18(56.93%)>G11(55.68%)>G6(54.42%)>MY51(51.97%);对致病菌LMGF7的抑制率大小为:M1(66.90%)>TM11(65.65%)>M3(64.45%)>MG6(62.65%)>G6(62.03%)>G11(60.82%)>G18(60.24%)>G14(59.04%)>M2(56.02%)>MY51(52.40%)>MG5(50.56%)。经过形态学和分子生物学共同鉴定菌株G6和G18为裂褶菌(Schizophyllum commune),G11和G14为烟管孔菌(Bjerkandera adusta),MG5和MG6为球孢瓶束霉(Ascodesmis sphaerospora);M1和M2为长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum),MY51为槭射脉革菌(Phlebia acerina),M3为拟康氏木霉(Trichoderma koningiopsis),TM11为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。生物学特性试验显示,生防真菌生长的最适碳源为葡萄糖和果糖,最适氮源为蛋白胨和酵母膏,多数生防真菌最适C/N为20/1,少数为其他比例;最适生长温度在25℃-30℃范围内,金属离子对生防菌株均有毒害作用,Cu2+毒害作用最强。(3)生防真菌与致病菌在对峙培养时,生防真菌缠绕、附着致病菌菌丝,使致病菌菌丝畸形、溢缩、溶解甚至断裂,可能与生防真菌所产的蛋白酶、纤维素酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶等细胞壁降解酶相关。代谢产物抑菌试验显示:有4株生防真菌的挥发性代谢产物对蓝莓根腐病具有显著的抑制效果(P<0.05),抑制率最高为42.26%,有3株生防真菌的非挥发性代谢产物也具有的抑制效果(P<0.05),抑制率最高为42.86%。对生防真菌非挥发性抑菌代谢产物进行测定,发现了13种已知抑菌活性物质,包含了生物碱、酮类、酯类、酚类以及有机酸等;生防真菌的抑菌性广谱试验表明:生防真菌对蓝莓枝枯病病菌(Neofusicoccum parvum)、小麦赤霉病病菌(Fusarium graminearum)、高粱炭疽病病菌(Colletotrichum sublineola)等6种常见的植物病原真菌有较好的拮抗活性;同时,部分生防真菌具有促生的潜质:可分泌吲哚乙酸(IAA),具有溶磷、解钾能力。以上结果表明,生防真菌TM11、G18、MG6和M1可以通过多种途径有效防治根腐病致病菌。(4)盆栽试验中,发现致病菌LMGF6和LMGF7对不同蓝莓品种均有致病性,但致病力存在差异。不同蓝莓品种对致病菌的敏感性程度从高到低为:‘莱格西’>‘奥尼尔’>‘灿烂’。生防真菌对蓝莓根腐病致病菌的盆栽防效结果表明:生防真菌单独接种时,处理1(接种生防真菌48 h后接种致病菌)的防效较处理2(接种致病菌48 h后接种生防真菌)的防效好,其中菌株TM11的防效最好,G18的防效次之,MG6的防效最差;生防真菌组合防效结果表明:G18+MG6+TM11组合的防治效果最好,对LMGF6和LMGF7的相对防效分别为88.87%和84.64%。幼苗的生理生化指标以及抗性指标的测定结果显示:幼苗叶绿素的含量以及POD、SOD、CAT酶活性较清水对照有显著提高(P<0.05),CAT活性在MG6+LMGF7处理中最高,根中的活性较对照组提高1.08倍,在叶中的活性较对照组提高了86.70%;SOD在根中的活性在G18+MG6+LMGF6组合最高,为539.37 U/g,叶中的活性在TM11+G18+LMGF6处理中活性最高,为351.70 U/g;POD活性在单独接种TM11的处理中最高,在根中活性较对照组分别提高了1.41倍,在叶片中活性较对照组提高了1.49倍。表明生防真菌TM11、G18和MG6可以激活植株的防御系统。