mTOR信号通路在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用及机制研究

被引量 : 0次 | 上传用户:hyhf_lwh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)是一种进化上相对保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,参与体内多种生物过程,包括自噬、蛋白合成、脂质合成、肌动蛋白动力学、神经元形态学等。蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑损伤的机制甚多,小胶质细胞的激活在其中作用显著。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白对细胞的增殖活化有明显的促进作用。迄今尚没有关于m TOR在SAH后小胶质细胞激活中的作用研究。目前研究表明蛛网膜下腔出血后m TOR信号通路激活、小胶质细胞激活。但其作用机制还有待进一步探讨。为此,在本研究中,我们第一次探讨蛛网膜下腔出血后m TOR信号通路在不同时间的的表达,并研究了抑制该信号通路能否改善蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤(early brain injury,EBI)及其可能机制。研究方法:24只健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为4组,每组6只,假手术组,SAH-3h组,SAH-24h组,SAH-72h组。主要探究蛛网膜下腔出血模型中m TOR通路的时间点表达。将72只SD大鼠分为四个组,sham组18只,SAH+溶剂组18只,SAH+雷帕霉素组18只,SAH+AZD8055组18只。本实验采用视交叉前池注血模型:SD大鼠视交叉前脑室20秒内注入0.3ml无肝素动脉血,从而建立实验性蛛网膜下腔出血动物模型。在SAH+雷帕霉素组中,模型建立的第4个小时,腹腔注射雷帕霉素(150ug/kg)。SAH+AZD8055组中,同样在建模后第4小时,AZD8055以14mg/kg剂量腹腔注射。SAH动物模型建立完毕的第24小时处死大鼠,取出大鼠额颞底皮层脑组织做标本,采用蛋白质印迹(western-blot)分析脑组织中m TOR信号通路表达情况,免疫荧光染色来分析小胶质细胞的表达,干湿法测定水肿指数,western-blot分析脑组织中白蛋白含量来评价出血后的血脑屏障(blood–brain barrier BBB)的通透性,TUNEL与FLUORO-JADE B荧光染色测定神经细胞的凋亡及坏死比率,相关的试剂盒来测定新鲜脑组织中细胞因子释放。结果:通过各种之间的蛋白表达水平的比较,得出蛛网膜下腔出血后,m TOR及其下游P70S6K总量无明显变化(P>0.05),但其磷酸化水平显著增高(P<0.05),并在第24小时达到最高。免疫荧光结果显示:与正常组相比,安慰剂SD大鼠皮质小胶质细胞显著激活(P<0.01),雷帕霉素及AZD8055组SD大鼠与安慰剂组SD大鼠相比,小胶质细胞表达显著降低(P<0.05),雷帕霉素与AZD8055组间无明显差别(P>0.05)。ELISA结果显示:与正常组相比,安慰剂SD大鼠皮质TNF-α、IL-1β含量明显增高(P<0.05),雷帕霉素及AZD8055组SD大鼠与安慰剂组SD大鼠相比,小胶质细胞表达显著降低(P<0.05),雷帕霉素与AZD8055组间无明显差别(P>0.05)。免疫蛋白印迹结果显示:p-m TOR,p-P70S6K,p-4EBP1在正常组低表达,与正常组相比,安慰剂组样本上上述蛋白表达水平明显增高(P<0.01),而雷帕霉素及AZD8055组与安慰剂组相比上述蛋白表达明显减少(P<0.05)。雷帕霉素、AZD8055一定程度上减轻了SAH后的早期脑损伤,包括了细胞凋亡、坏死、脑水肿以及血脑屏障破坏指标。结论:蛛网膜下腔出血后,m TOR信号通路被激活,雷帕霉素、AZD8055通过抑制m TOR信号通路从来一定程度上减轻了SAH模型中早期脑损伤,这有可能是通过抑制小胶质细胞的激活来实现的。
其他文献
瓦斯抽放监测是确保煤矿安全生产的关键,普通巡检方式测点覆盖面小,劳动量大。基于S形皮托管的测量原理,研制了一款可同时测量流量与多种气体浓度的检测件,同时,针对管道接口
蓟县剖面形成于燕山裂陷槽内,其沉积盆地是在中元古代早期华北原地台北缘东西向大规模破裂时伸进大陆内部的一支废弃的裂谷基础上发展起来的,它不同于被动大陆边缘,因此不包
在燕山中段南麓的蓟县北部山区有着中国国家地质公园,中国北方中-新元古代正层型剖面标志碑就耸立在那里。对这一地区基本地质事实和地质体真实位态的研究,不仅关系着对华北地
在《汉语水平等级标准与语法等级大纲》乙级语法部分里,谈到假设复句“如果……就……”结构。这一结构是留学生学习汉语时必须要掌握的结构之一。“想A就A”是由“如果想A,就A
目的探讨MRI及MRS对外伤性脑梗死的早期诊断、及时治疗和判断预后的临床指导价值。方法对51例外伤性脑梗死患者分为三组行影像学(MRI及MRS)检查,并检测其外伤性脑梗死区内一
光纤光栅压力传感器中光栅与金属基片的连接方法主要分为胶装工艺与金属化封装工艺,工艺不同传感器会出现蠕变等现象,也会直接影响传感器的测量精度。对自主设计的悬臂梁式光
进入21世纪后,"影子教育"在全球范围内迅速蔓延,而我国"影子教育"的迅速发展,影响了实行义务教育的初衷即实现教育公平。因此,政府应正视"影子教育"带来的影响,以便能正确迅
根据煤矿井下乳化液的配液现状,研制了ZMJ-KRPYZ-10新型矿用乳化液自动配液站。该配液站具有全封闭结构、全自动大流量高精度配液以及自动上传数据等特点,适用于存在危险性爆
壳寡糖和喹唑啉环是两类均有药用活性的母体化合物,应用活性基团拼接法把喹唑啉环引入壳寡糖分子结构中,设计合成了一系列含不同氨基葡萄糖单元的壳寡糖和不同喹唑啉环数目的
隐喻研究一直是语言学中的热门话题。西方最早的关于隐喻的研究可以追溯到亚里士多德,然而,当时隐喻只是被视为一种修辞现象。随着语言学的快速发展,20世纪70年代,认知语言学