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藻蓝蛋白(phycocyanin, PC)是一种普遍存在于蓝藻(blue-green algae,又称 cyanobacteria)中,含开链四吡咯结构的天然蓝色素。在活细胞中,藻蓝蛋白既可以作为蛋白存储单位,也可以作为抗氧化剂,使细胞在一定限度内免受光损伤。动物实验表明,藻蓝蛋白有抗肿瘤作用,能有效预防大肠炎等疾病。藻蓝蛋白的这些属性,使它广泛应用于食品、化妆品、医药等领域,具有广阔的应用前景。 本论文采用DEAE-Sepharose Fast Flow结合羟基磷灰石(hydroxylapatite, HA)柱层析法,分离纯化人工养殖钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中的藻蓝蛋白,经脱盐、冷冻干燥后得到了具有经济价值的藻蓝蛋白纯品。 紫外/可见吸收光谱显示所得样品最大特征吸收波长为620nm,蛋白浓度>30%时,OD620/OD280>5.0,OD620/OD650>2.0。SDS-PAGE结果表明,纯化的藻蓝蛋白样品由两种亚基(即α、β亚基)组成,分子量分别为16.5kDa、17.6kDa;结合非变性凝胶电泳检测结果,推测实验条件下藻蓝蛋白样品主要以(α β)3型杂聚体形式存在。 本文所述分离纯化藻蓝蛋白的方法,具有蛋白活力高,成本低,重复性好等优点,为大规模生产提供可靠依据。本方法已申请专利,专利申请号为:02150919.0。