华支睾吸虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病。据估计，全球约有3500万人感染华支睾吸虫，其中我国大约有1500万人感染。本病可使肝脏肿大，并导致肝脏病变，病情多呈慢性经过。该病分布于我国多个省、市、自治区，其中以广东省人群的感染率最高。目前，广东省犬猫华支睾吸虫的感染情况还不清楚；另外，在国内还没有华支睾吸虫特异PCR方法的报道。因此，本论文的研究目的为：一，调查广东省犬猫华支睾吸虫的感染情况；第二，评价核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)序列的变异情况；第三，建立华支睾吸虫特异PCR检测方法。 本次共调查犬503只，猫208只，所用的检查方法为肝胆管直接剖检法。结果显示广东省犬和猫的华支睾吸虫病总感染率分别为20.29％和45.67％，犬的感染以轻度感染为主，感染强度为1～10(条/只)的犬占阳性犬的48％，而猫的感染情况要比犬的严重。 应用PCR方法，以保守引物NC5及NC2扩增来自四个地方的10个华支睾吸虫样品rDNA的ITS及5.8S序列，并进行克隆转化及测序。序列比对结果表明，华支睾吸虫ITS及5.8S序列序列全长为1113～1117bp，G+C含量为53.27％～53.54％。其中ITS-1序列的长度为653～657bp，5.8S为159bp，ITS-2序列长度为301bp；10个样品的ITS-1和ITS-2的序列相似性分别高达99.2％和99.3％。与GenBank上的来自韩国、广西和沈阳的样品进行比较，结果证明了这些样品种内ITS没有明显变异，可以作为华支睾吸虫的遗传标记。 分别在华支睾吸虫ITS序列的第508bp-527bp和891bp-910bp处设计了针对华支睾吸虫的特异上下游引物Cstjd1和Cstjd2，扩增产物目的片段大小为403bp。特异性实验和敏感性实验表明，特异引物与对照样品如日本血吸虫、麝猫后睾吸虫、大片吸虫、肝片吸虫、猫弓首蛔虫等无交叉反应性，特异引物能检测华支睾吸虫的最低DNA量是1.03pg。 建立了华支睾吸虫囊蚴特异PCR检测方法，能检测到囊蚴的最低感染强度为1.1个/克。用此方法检测12份阳性鱼样品，结果全部显示阳性。此外，还建立了华支睾吸虫虫卵特异PCR检测方法，能检测到虫卵的最低感染强度为10个/克；并将此方法用于检测人和猫的阳性粪便，PCR扩增均能扩增出目的条带。 本研究中的流行病学调查为更好地防治动物华支睾吸虫病提供了重要的数据。 在国内首次建立了华支睾吸虫特异PCR检测方法，为本病的诊断和流行病学调查等提供了分子生物学方法，研究结果也为对华支睾吸虫进一步的研究奠定了基础。