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目的：肝纤维化是继发于各种慢性致病因素引起的肝脏炎症损伤后组织修复过程中的代偿反应,以细胞外基质的过度沉积为病理特征,是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理改变和必经途径。而肝纤维化发生的中心环节就是肝星状细胞的激活。在肝损伤的过程中,活化的肝星状细胞是肝纤维化形成过程中产生胶原的主要细胞。此外,长期过量饮酒可导致酒精性肝病的发生,使细胞外基质和胶原蛋白过度沉积,进而发展成肝纤维化以及肝硬化。酒精性肝病是世界范围内慢性肝病的最重要病因之一,严重危害人民健康。严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死或肝功能衰竭,甚至会加剧慢性病毒性肝炎以及非酒精性肝病的发生。因此,发现更多新源药物更深入的研究抗肝纤维化作用靶点是肝纤维化治疗的迫切需要。本研究采用硫代乙酰胺诱导慢性肝纤维化模型和慢性酒精喂养加急性酒精灌胃的酒精性肝病小鼠模型,通过体外、体内实验研究百里香醌以及白桦酯醇的肝保护作用及潜在的作用机制。方法：(1)百里香醌通过调节TLR4及LKB1-AMPK信号通路抑制肝纤维化实验研究。体外实验中用不同浓度的百里香醌预处理肝星状细胞(T-HSC/CI-6)1小时后,加入1 pg/ml内毒素(LPS)孵育24小时,收集细胞提取蛋白进行检测。体内实验使用硫代乙酰胺建立小鼠慢性肝纤维化模型,腹腔注射硫代乙酰胺(200 mg/kg)每周三次连续五周。百里香醌(20 mg/kg或40 mg/k g)与硫代乙酰胺同时给药直至第五周,通过H&E染色,Masson三色染色,以及免疫组织化学染色考察百里香醌的肝保护作用。通过蛋白印迹实验以及PCR技术检测百里香醌对肝星状细胞collagen-1、α-SMA、TLR4、CD14、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、c-FLIPL、XIAP、 AMPK、p-AMPK、LKB1、p-LKB1蛋白表达的影响。(2)白桦酯醇通过调节LKB1-AMPK信号通路干预酒精性脂肪肝实验研究。体外实验中用不同浓度的白桦酯醇预处理肝星状细胞(LX-2)1小时后,加入50mM酒精孵育24小时,收集细胞提取蛋白进行检测。体内实验使用慢性酒精喂养加急性酒精灌胃建立酒精性肝病小鼠模型,用含酒精的Lieber-DeCarli饮食喂养小鼠10天,然后用单剂酒精灌胃(5g/kg体重)1次,同时每天灌胃给予白桦酯醇(20 mg/kg或50mg/kg),通过H&E染色以及免疫组织化学染色考察白桦酯醇的肝保护作用。通过蛋白印迹实验以及免疫荧光技术检测白桦酯醇对肝星状细胞collagen-1、α-SMA、SREBP-1、NF-κB p65、AMPK、p-AMPK、LKB1、p-LKB1、SIRT1蛋白表达的影响。结果：(1)体外实验结果表明,百里香醌能够有效降低HSCs细胞活性。百里香醌能够抑铺CD14、TLR4的蛋白水平。同时,百里香醌明显抑有PI3K/Akt的磷酸化,以及collagen-1、α-SMA蛋白的表达。体内实验结果显示百里香醌能够有效治疗肝纤维化,减少了由硫代乙酰胺刺激后造成的细胞外基质的沉积和α-SMA的增多。百里香醌能够降低由硫代乙酰胺诱导的TLR4的升高以及P13K的磷酸化,此外,百里香醌能够增加LKB1-AMPK的磷酸化作用。(2)体外实验结果表明,白桦酯醇能够有效降低LX-2细胞活性。白桦酯醇能够抑南SREBP-1蛋白的核转移。同时,白桦酯醇能够显著激活LKB1-AMPK信号通路。病理组织学结果显示白桦酯醇能够抑制酒精诱导的肝脏脂肪变性和坏死,同时,白桦酯醇能够有效抑制酒精诱导的SREBP-1蛋白表达,增力LKB1-AMPK的磷酸化作用,与体外结果一致。此外,体外、体内实验结果表明白桦酯醇能够显著增加酒精诱导的SIRT1蛋白的表达。结论：百里香醌通过阻断TLR4-PI3K信号通路介导炎症反应来抑铝α-SMA, collagen-I的沉积,以及激活LKB1-AMPK信号通路调节肝纤维化进程。白桦酯醇通过降低SREBP-1蛋白的核转移,增力LKB1-AMPK的磷酸化,以及SIRT1蛋白的表达来改善由乙醇诱导的肝脏脂质代谢,降低甘油三酯的蓄积而起到抑制酒精性肝病的作用。综上所述,百里香醌以及白桦酯醇对抑制肝纤维化以及酒精性脂肪肝有显著的肝保护作用,具有潜在的药理学治疗特性。但是作为新源药物仍需要进一步深入研究,确定其确切的肝保护机制。