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文心兰属热带附生兰,是兰科(Orchidaceae)文心兰属(Oncidium Sw.)的热带复茎性气生兰。文心兰是世界重要的切花及盆栽种类之一,市场前景相当广阔。研究文心兰多倍体育种,有助于文心兰的新品种开发,增加文心兰的观赏性提高其在市场中的价值,对文心兰育种和种质创新具有非常重要的意义。本实验以文心兰Wilson Tropic Breeze ’Everglades’组培苗为实验材料,利用秋水仙素结合组织培养技术对文心兰多倍体诱导进行研究,以达到获得文心兰四倍体的目的。主要结果如下:1.通过利用秋水仙素混培法和秋水仙素浸泡法,对文心兰组培苗的原球茎进行诱导处理,结果表明,秋水仙素浸泡法诱导的文心兰多倍体的诱导率为26.67%,是秋水仙素混培法的4倍,秋水仙素浸泡法诱导得到的幼嫩材料更多,且诱导速度快,但对材料的毒害较大,所以处理时间和处理浓度要严格控制。进行秋水仙素诱导前,先对试验材料进行一段时间的恢复培养有利于对材料进行诱导处理后存活率的上升。2.通过形态学、细胞学和流式细胞术的初步鉴定发现,文心兰变异植株表现出多倍体特征,如生长缓慢,植株矮壮,茎段变粗,叶形指数变小,叶片颜色深绿,叶片下表皮气孔数减少,气孔保卫细胞增大等特点。二倍体叶形指数8.25,多倍体叶形指数5.27,多倍体气孔数量是二倍体的46.47%,多倍体保卫细胞长度是二倍体的143.28%,多倍体包围细胞宽度是二倍体的130.60%,流式细胞术检测结果发现四倍体植株的相对DNA含量是二倍体的二倍。3.建立文心兰染色体制片技术。上午9:00选用饱和对二氯苯或0.1%秋水仙素+0.002mol/L8-羟基喹啉的混合液处理4h,卡诺氏液固定12-24h后,采用酸解法在水浴锅中60℃恒温解离8mmin后,用改良的苯酚品红溶液染色5min。观察到的染色体清晰可辨,对染色体进行计数2n=72、4n=144。4.对生理生化指标进行鉴定,文心兰多倍体植株各项生理生化指标高于正常的二倍体植株。其中,四倍体的叶绿素a含量是二倍体的157.09%,四倍体的叶绿素b含量是二倍体的107.31%,四倍体的总叶绿素含量是二倍体的135.85%,四倍体的过氧化物酶活性是二倍体的117.79%,四倍体的过氧化氢酶活性是二倍体的130.36%。