葡萄作为世界上产量最大的水果作物之一，2010年FAO数据统计世界葡萄年产量达到了6701.7万t，其中中国2010年葡萄产量高达865万t，越居世界第一位。在这些葡萄加工中，会产生约占葡萄加工量的25%³0%的皮渣等副产物，其中主要有葡萄皮、果梗、种子等。白藜芦醇虽然已经至少在72种植物中存在，但各植物中含量很低，而红葡萄中白藜芦醇的含量最高,为50¹00μg/g，其中葡萄皮中含量最高。白藜芦醇具有抗肿瘤、保护心血管、抗氧化、抗衰老、保护神经系统、抗菌、抗炎等药理作用。从葡萄皮中提取白藜芦醇即变废为宝，同时又能创造出重要的社会效益。因此研究葡萄皮中白藜芦醇的提取工艺及白藜芦醇对细胞损伤的保护作用，具有重要意义。本文采用有机溶剂振荡法及复合酶辅助有机溶剂振荡两种方法来提取葡萄皮中的白藜芦醇，采用正交试验、响应曲面法等试验分析手段，分析提取时间、有机溶剂的浓度、提取温度、加酶量、酶处理的时间和温度等多个因素对提取量的影响，以获得提取白藜芦醇最佳的工艺。另外，本课题以人脐静脉血管内皮细胞为材料，用H₂O₂诱导其凋亡，建立细胞凋亡模型，并研究白藜芦醇对HUVE细胞损伤的保护作用。论文以赤霞珠葡萄皮为原料，首先研究了乙醇振荡提取葡萄皮中白藜芦醇的最优工艺，在单因素试验基础上采用正交试验分析了乙醇浓度、浸提温度和浸提时间对提取量的影响，结果显示，这三个因素的主次顺序为：浸提温度>乙醇浓度>浸提时间，并由正交试验获得了乙醇振荡提取葡萄皮法的最优条件，即乙醇的浓度80%，浸提时间2h，浸提温度50℃，白藜芦醇的提取量达到了102.23μg/g。由于单独的乙醇振荡提取葡萄皮中白藜芦醇的提取量不是很高，本文重点研究了复合酶辅助乙醇振荡提取葡萄皮中白藜芦醇的最优工艺，在该方法中，乙醇浓度、浸提时间和浸提温度均与乙醇振荡提取法中保持一致，只是考察了复合酶水解的条件，即加酶量、酶解温度、酶解时间和pH，在单因素实验基础上，由Box-Behnken设计试验，用响应曲面法对实验结果进行分析，获得了提取白藜芦醇的最优条件，即加酶量为3.3mg/g、酶解温度49℃、pH5和时间2h，此条件下提取量的预测值为192.83μg/g。而在此条件下进行3次实验，测得的白藜芦醇提取量均值为190.96μg/g，与理论预测值192.83μg/g相对误差很小。该提取方法的提取效果较好，其提取量是直接乙醇振荡提取的1.87倍。此外，本文研究了白藜芦醇对H₂O₂诱导HUVE损伤的保护作用，主要从细胞生长活力、细胞的凋亡率及细胞周期蛋白D1的表达方面进行了研究。结果为：（1）白藜芦醇可以减轻H₂O₂（50μmol/L）对HUVE细胞生长活力的抑制作用：MTT检测结果显示，1μmol/L Res的处理、10μmol/L Res的处理、30μmol/LRes的处理分别使生存率从（56.43±0.45）%提高到（77.14±1.36）%、（92.97±0.62）%和（73.49±0.53）%（P<0.01）；（2）白藜芦醇可以降低H₂O₂对HUVE细胞的凋亡率：流式细胞仪结果显示，1μmol/L的白藜芦醇能显著降低H₂O₂诱导的HUVE的凋亡（由（38.21±1.02）%降为（18.32±1.68）%，P<0.01），10μmol/L的白藜芦醇使细胞的凋亡率降低至（1.51±1.62）%（P<0.01）；（3）白藜芦醇能够上调H₂O₂诱导的HUVE损伤的细胞周期蛋白D1（CyclinD1）基因的表达：通过荧光定量RT-PCR检测细胞周期蛋白（CyclinD1）基因的表达，PCR结果显示，cyclinD1在50μmol/LH₂O₂处理组的表达量是细胞正常对照组的0.18倍，而50μmol/LH₂O₂+10μmol/LRes组使其表达量提高到正常对照组的0.80倍，即白藜芦醇上调H₂O₂诱导细胞损伤的细胞周期蛋白D1（CyclinD1）基因的表达。