肝癌门静脉癌栓形成的分子机制研究

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目的探究肝癌门静脉癌栓形成的机制。方法第一部分:采集3例肝癌患者的门静脉癌栓组织,将癌旁组织设为对照,提取总RNA,利用RNA-Seq技术检测差异表达的信使核糖核酸(messenger RNA,m RNA),用基因本体(Gene Ontology,GO)和通路富集分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)差异表达的基因。初步探讨门静脉癌栓形成的可能机制。第二部分:通过免疫组化及生物信息分析技术对m RNA的表达及在肝细胞肝癌与其他组织中的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白质的表达情况进行探讨。了解其与肿瘤发生发展及临床预后的关系,并对和VEGF存在共表达关系的基因作GO和KEGG等分析,以探究VEGF在肝癌细胞中参与的信号通路及其潜在的分子生物学机制。结果第一部分:通过对RNA-Seq结果的分析共获得7233个差异表达的编码基因,其中在肝癌患者门静脉癌栓中上调的有3700个,下调的有3533个,富集分析发现这些基因广泛参与细胞多种生命进程及多个已经被研究证实的癌症相关通路。第二部分:VEGF在肝癌和癌旁组织中均可见有阳性表达,并且在肝癌患者中,VEGF表达水平具有预后诊断价值,高表达VEGF的患者总生存率和无病生存率均较差,并具有统计学意义。VEGF参与多种生物学行为,它与细胞生存、肌动蛋白识别、细胞骨架的重建、细胞的分化迁移、基因表达高低、血管细胞渗透能力等有关,从而影响血管生成。结论1、在肝癌患者门静脉癌栓组织中存在大量的m RNA表达的异常;2、VEGF在肝癌和正常肝组织中均可见有表达,VEGF表达高的患者总生存率与无病生存率均较差。图 31 幅;表 8 个;参 55 篇。
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