激素诱导人骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化的实验研究

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临床上非创伤性股骨头坏死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)多见,致残率高。其中,肾上腺糖皮质激素[简称激素]引发的ONFH已占第一位,临床组织学及病理学研究证明:激素性ONFH的早期病理变化是股骨头骨髓内造血组织减少,脂肪组织增多,骨小梁内骨细胞数目减少。 已有实验证明激素能够诱导动物骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化,并引起脂质代谢异常,继而发生股骨头坏死。这种现象与激素性ONFH的病理变化相似,提示激素性ONFH可能与激素直接诱导BMSCs分化成脂肪细胞有关。以上结论都是通过体外培养动物BMSCs得出上述结论,由于人和动物间种属的区别,通过人的BMSCs体外分离培养来研究激素性ONFH发病机制的文献尚未见到报道。 我们在分离获取原代人的BMSCs的基础上,传代后加入地塞米松进行体外培养,采用分子生物学检测方法,观察地塞米松对hBMSCs的影响,深入探讨激素性ONFH的发病机制。 材料和方法 骨髓细胞来自郑州大学一附院临床自愿提供者。在髂前上棘处取髂骨骨髓,通过密度梯度离心,贴壁分离培养,对原代的hBMSCs进行传代后,随机分为两组,加入浓度为10-7M的地塞米松的作为实验组,并以不加地塞米松的作为对照组,继续培养细胞5天。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测细胞中成脂转录因子(adipogenic transcription factor)PPAR γ mRNA和骨钙素(Osteocalcin)mRNA的表达。
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