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目的:本研究采用16s rDNA高通量测序技术分析原发性宫颈癌和复发性宫颈癌之间阴道菌群多样性的差异,并结合临床病理指标分析阴道菌群紊乱与宫颈癌复发的关系,为临床制定延缓宫颈癌复发,延长宫颈癌患者生存时间,改善预后的治疗措施提供指导。方法:1.选取2022-2至2023-2在南昌大学第二附属医院就诊的35例原发性宫颈癌患者（Primary cervical cancer patient,以下简称PC组）和25例复发性宫颈癌患者（Recurrent cervical cancer patient,以下简称RC组）。均明确诊断但未治疗,所有研究对象均签署知情同意书。2.所有患者就诊时采集阴道分泌物,其中由于临床数据缺失剔除PC组中2例病例,RC组中3例病例,因阴道菌群DNA提取失败再进一步剔除PC组中2例病例,RC组中4例病例,剩余的PC组31例病例和RC组18例病例的阴道分泌物送至上海派森诺公司行16s rDNA高通量测序,该技术采用Illumina平台对微生物16s rDNA的V4（a）区进行测序,依据测序结果按照“界、门、纲、目、科、属、种”的分级方法对阴道菌群进行分级并行物种多样性分析。其中对人体健康有利的阴道细菌被定义为“益生菌”,如乳酸杆菌、双歧杆菌和链球菌,对人体健康造成危害的阴道细菌我们将其归纳为为“致病菌”,如普雷沃菌、加德纳菌、拟杆菌、厚壁菌等。3.收集原发性宫颈癌患者和复发性宫颈癌患者首次就诊时的临床资料如年龄、身高、体重、体重指数（Body Mass Index,BMI）、孕产次、人乳头瘤病毒（Human papilloma virus,简称HPV）感染情况、淋巴细胞比例（Lymphocyte ratio）、中性粒细胞比例（Neutrophil ratio）、血红蛋白浓度（hemoglobin）、血清鳞状上皮相关抗原（Squamous cell carcinoma antigen,简称SCCA）以及临床FIGO分期、病理分级、病理类型、淋巴结转移、肿瘤大小。结果:1.两组患者临床资料分析:两组患者年龄、体重、身高、BMI、孕产次、HPV感染情况、肿瘤大小、病理类型,均无统计学差异（P＞0.05）,而淋巴结转移具有统计学差异（P＜0.05）,病理分级、FIGO分期均具有显著性统计学差异（P＜0.01）,结果表明淋巴结转移、病理分级、FIGO分期与宫颈癌复发有相关性。2.两组患者阴道菌群的多样性分析:多样性分析包括Alpha多样性和Beta多样性,Alpha多样性对其中的Chao1指数、香农（Shannon）指数以及辛普森（Simpson）指数进行统计分析,结果显示与PC组相比,RC组的Chao1指数（136.25 vs 84.21,P＜0.01）、Shannon指数（3.18 vs 2.41,P＜0.05）以及Simpson指数（0.78 vs 0.63,P＜0.05）均显著增大,且均具有统计学差异,但Beta多样性无明显差异,说明了RC组的阴道菌群Alpha多样性高于PC组;韦恩（VENN）图显示RC组特有OUT为1104个,PC组为921个,说明两组间阴道菌群组成差异明显。3.两组患者阴道菌群群落门水平分析:PC组和RC组在门水平排名前五的优势菌门均为致病菌菌门,分别是拟杆菌门、梭杆菌门、厚壁菌门、变形菌门和放线菌门,PC组前5种优势菌门占总测序量的96.64%,RC组前5种优势菌门占总测序量的97.14%;与PC组相比,RC组患者拟杆菌门（73.06%vs59.54%,）、变形菌门（6.24%vs 4.16%）的相对丰度增加,而梭杆菌门（11.03%vs 22.49%）、厚壁菌门（6.18%vs 7.76%）和放线菌门（0.63%vs 2.69%）的相对丰度降低,但差异均无统计学意义。4.两组患者阴道菌群群落属水平分析:PC组和RC组在属水平排名前五的优势菌属均为致病菌菌属,分别是普雷沃菌属、卟啉单胞菌属、纤毛菌属、拟杆菌属和假单胞菌属,PC组前5种优势菌属占总测序量的77.09%,RC组前5种优势菌属占总测序量的74.47%;对于致病菌而言,与PC组相比,RC组患者普雷沃菌属（35.49%vs 31.27%）、拟杆菌属（14.03%vs 2.90%,P＜0.05）、假单胞菌属（4.80%vs 1.67%）的相对丰度增加,而卟啉单胞菌属（14.9%vs18.9%）、纤毛菌属（5.25%vs 22.35%,P＜0.05）的相对丰度降低,其中拟杆菌属、纤毛菌属差异有统计学意义。对于益生菌而言,与PC组相比,RC组患者乳酸杆菌属（1.12%vs 3.72%）的相对丰度降低。5.阴道菌群与临床检验指标的相关性分析:相关性研究显示Prevotella的相对丰度与SCCA（r=0.2952,p＜0.05）呈正相关,而Prevotella与中性粒细胞比例（r=0.1288,p＞0.05）、淋巴细胞比例（r=-0.0377,p＞0.05）相关性无统计学意义;Lactobacillus的相对丰度与淋巴细胞比例（r=0.3334,p＜0.05）呈正相关,而Lactobacillus与SCCA（r=-0.1283,p＞0.05）、中性粒细胞比例（r=-0.1499,p＞0.05）相关性无统计学意义。6.两组患者组内阴道菌群的多样性分析:对PC组和RC组患者组内HPV感染（阳性vs阴性）、临床FIGO分期（I-II期vs III-IV期）、淋巴结转移（无vs有）、病理分级（低中分化vs高分化）、病理类型（鳞癌vs腺癌）、肿瘤大小（＜4cm vs≥4cm）的Chao1指数、Shannon指数、Simpson指数进行对比分析,结果显示有统计学差异的有:PC组组内HPV感染（阳性vs阴性）在Chao1指数上均值分别为90.62,40.92,P＜0.05,RC组组内淋巴结转移（无vs有）在Chao1指数上均值分别为0.73,0.85,P＜0.05,RC组组内肿瘤大小（＜4cm vs≥4cm）在Chao1指数上均值分别为105.36,184.78,P＜0.05,综上,说明原发性宫颈癌组患者中有HPV感染较无HPV感染者的阴道菌群紊乱;复发性宫颈癌组患者中有淋巴结转移、肿瘤≥4cm的患者较无淋巴结转移、肿瘤＜4cm者阴道菌群紊乱。结论:（1）与原发性宫颈癌患者相比,复发性宫颈癌患者阴道菌群紊乱,表现为Alpha多样性增高,在属水平上,其乳酸杆菌属的相对丰度降低,致病菌属相对丰度升高。（2）相关性分析揭示了阴道菌群紊乱与宫颈癌复发具有相关性,其机制可能是阴道菌群紊乱使益生菌丰度下降,致病菌增加,造成机体阴道局部抵抗力下降,最终导致宫颈癌的复发,但其具体机制仍需进一步探究。