【摘 要】
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目的:1.初步了解早产小鼠早期不同发育时期调节性T细胞（CD4+CD25+Foxp3+T cell,Treg）分化特点。2.探讨早期常乐康干预对早产小鼠体内Treg细胞分化影响及可能作用机制方法:1.动物模型建立:随机选取孕18天的BALB/c母鼠腹腔注射米福RU486诱导早产,获得胎龄小于20天的新生早产小鼠;另随机选择已孕母鼠待其自然分娩,获得胎龄大于20天的新生足月小鼠。2.分组:将早产小鼠
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目的:1.初步了解早产小鼠早期不同发育时期调节性T细胞（CD4+CD25+Foxp3+T cell,Treg）分化特点。2.探讨早期常乐康干预对早产小鼠体内Treg细胞分化影响及可能作用机制方法:1.动物模型建立:随机选取孕18天的BALB/c母鼠腹腔注射米福RU486诱导早产,获得胎龄小于20天的新生早产小鼠;另随机选择已孕母鼠待其自然分娩,获得胎龄大于20天的新生足月小鼠。2.分组:将早产小鼠随机分为早产实验组（Ⅰ组）和早产对照组（Ⅱ组）,足月小鼠为足月对照组（Ⅲ组）3.处理:在IVC环境下饲养,自生后第一天（postnatal day 1,P1）起,Ⅰ组予以常乐康(酪酸梭状芽孢杆菌1.0×10~5CFU/g、婴儿型双歧杆菌1.0×10~4CFU/g 1进行灌胃,Ⅱ组和Ⅲ组予以相同剂量的生理盐水进行灌胃,连续7天,且无其他干预措施。4.取材:分别于P1、P14、P21从三组中新生小鼠中随机选取15只。经腹腔麻醉后,采用摘眼球取血法获取外周血,使用肝素抗凝管抗凝,置于冰上备用。5.检测方法:采用流式细胞仪检测不同时间点三组新生小鼠外周血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞的百分率;使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测三组新生小鼠不同时间点血清中IL-2和TGF-β的浓度。结果:1.Treg百分率:三组新生小鼠外周血中Treg的百分率在各时间点均有显著性差异,有统计学意义（P＜0.001）。早产组对照组（Ⅱ）Treg百分率自P1、P14至P21逐渐增高,且均明显低于对应时间点足月对照组（Ⅲ）（0.26±0.07 vs 0.35±0.07,4.55±0.97 vs 7.46±0.90,5.10±0.73 vs 8.15±0.86,%）（P＜0.05）;早产实验组（Ⅰ）Treg百分率在P1时与组Ⅱ相比无差别（0.28±0.07 vs 0.26±0.07,%）（P＞0.05）,但在P14、P21时均高于Ⅱ组（6.15±0.94 vs 4.55±0.97,7.33±1.09 vs 5.10±0.73,%）（P＜0.05）,但仍然低于Ⅲ组（P＜0.05）。2.IL-2浓度:三组新生小鼠血清中IL-2的浓度在各时间点均有显著性差异,有统计学意义（P＜0.001）。早产组对照组（Ⅱ）IL-2浓度自P1、P14至P21逐渐增高,且均明显低于对应时间点足月对照组（Ⅲ）（8.34±0.68 vs 12.02±0.79,43.19±13.24vs 118.52±14.65,48.33±14.21 vs 130.06±32.51,%）（P＜0.05）;在P1,IL-2浓度Ⅰ组与Ⅱ组相比无差别（8.44±0.64 vs 8.34±0.68,%）（P＞0.05）,但在P14、P21时均高于Ⅱ组（72.79±10.56 vs 43.19±13.24,98.76±12.35 vs 48.33±14.21,%）（P＜0.05）,但仍然低于Ⅲ组（P＜0.05）。3.TGF-β浓度:三组新生小鼠血清中TGF-β的浓度在各时间点均有显著性差异,有统计学意义（P＜0.001）。早产组对照组（Ⅱ）TGF-β浓度自P1、P14至P21逐渐增高,且均明显高于于对应时间点足月对照组（Ⅲ）（69.79±3.89 vs52.52±3.88,132.99±4.21 vs 84.08±9.07,144.04±12.02 vs87.44±11.54,%）（P＜0.05）;在P1,TGF-β浓度Ⅰ组与Ⅱ组相比无差别（71.09±4.75 vs 69.79±3.89,%）（P＞0.05）,但在P14、P21时均低于Ⅱ组（114.26±11.97 vs 132.99±4.21,109.51±9.95 vs144.04±12.02a,b,%）（P＜0.05）,但仍然低于Ⅲ组（P＜0.05）。结论:1.在早产小鼠出生后免疫系统发育中,早期Treg的分化相对较低下,随着年龄增长逐渐增加,但仍然低于同龄足月小鼠。2.早期常乐康干预可有效促进早产小鼠Treg的分化,其作用机制可能通过调控细胞因子IL-2和TGF-β的分泌发挥生物学作用。
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