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目的: 本研究拟通过不同剂量的维生素D3(vitamin D3,VD3)干预糖尿病大鼠,观察VD3对糖尿病大鼠血清和肝脏中糖脂代谢和氧化应激指标以及肝脏中GLUT2和Akt蛋白表达的影响,探讨维生素D3对肝脏胰岛素抵抗的影响及作用机制。 方法: 选取4周龄SPF级SD雄性大鼠120只,适应性喂养一周后,随机选取15只大鼠作为对照组(n=15),给予普通饲料喂养;剩余大鼠(n=105)通过高脂高糖饲料喂养5周后腹腔注射1%的链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)溶液(35mg/Kg)构建2型糖尿病大鼠模型。大鼠空腹血糖连续3次(注射后24h、72h和一周)>11.1mmol/L,为造模成功。选取80只糖尿病大鼠随机分为4组:模型组,低剂量组,中剂量组和高剂量组,每组20只。对照组和模型组每日给予花生油灌胃;低剂量组(0.075μg/Kg),中剂量组(0.150μg/Kg)和高剂量组(0.300μg/Kg)每日给予不同剂量的VD3灌胃,干预4周和12周。干预结束后收集大鼠血液和肝脏样本,使用全自动生化分析仪检测血清中空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,AST)水平;ELISA试剂盒测定血清胰岛素水平;生化试剂盒测定肝脏中肝糖原、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)水平;Western Blot测定肝脏中GLUT2和Akt蛋白的相对表达量。使用SPSS25.0软件对数据进行统计分析,检验水准α=0.05。 结果: (1)VD3干预对SD大鼠体重的影响:与对照组相比,各组糖尿病大鼠体重明显降低;与模型组相比,高剂量组大鼠体重升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 (2)VD3干预对大鼠糖脂代谢的影响:与对照组相比,糖尿病大鼠FBG水平升高,HDL-C水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,VD3干预各组FBG水平下降,HDL-C水平上升,差异有统计学意义(P<0.05);干预4周时,各VD3干预组大鼠肝糖原水平的上升,高、低剂量组大鼠胰岛素水平上升;干预12周时,各干预组大鼠胰岛素水平上升,高剂量组大鼠的血清TC水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。 (3)VD3干预对SD大鼠肝脏氧化应激水平的影响:与对照组相比,各组糖尿病大鼠肝脏中SOD活性下降,MDA水平上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,VD3干预各组大鼠SOD活性水平升高,中、高剂量组MDA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。 (4)VD3干预对SD大鼠肝功能和肝脏组织形态的影响:与模型组相比,干预4周时,各干预组大鼠血清AST水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。干预4周和干预12周的模型组大鼠肝脏切片显示肝细胞发生脂肪性变和炎性细胞浸润,而各干预组大鼠肝组织切片未呈现明显病变。 (5)VD3干预对SD大鼠GLUT2、Akt蛋白表达影响:干预4周时,中剂量组大鼠肝脏组织中GLUT2蛋白表达量高于模型组;各干预组大鼠肝脏组织中Akt蛋白表达量高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预12周时,中剂量组和低剂量组大鼠肝脏组织中GLUT2蛋白表达量高于模型组差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: VD3可降低糖尿病大鼠血脂、空腹血糖、血清AST水平,提高肝糖原和血清胰岛素水平,提升糖尿病大鼠肝脏抗氧化能力,增加肝脏中GLUT2和Akt蛋白表达水平,改善糖尿病大鼠肝组织胰岛素抵抗。