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哺乳动物的舌头具有感受酸、甜、苦、咸和鲜等味觉功能,这主要是由于舌头表面存在味觉乳头。已有研究发现,在小鼠舌味觉乳头的早期发育过程中Wnt/β-catenin具有重要的调控作用,然而很少在人类舌味觉乳头早期发育过程中进行验证。本研究第一部分首先检测了人胚胎舌味觉乳头的形态特征,重点检测了菌状乳头和轮廓乳头,其形态和发育过程与小鼠舌乳头基本相似,但也存在数量和排列等差异。同时利用RNA原位杂交技术检测Wnt/β-catenin信号通路的关键基因在人舌胚的表达模式;结果显示,在人舌味觉乳头早期发育过程中Wnt/β-catenin信号通路具有较高的活性。其次,取不同时期的人舌胚进行组织培养,在培养体系中加入CHIR-99021小分子化合物,从而提高其Wnt/β-catenin信号活性。结果发现实验组的人舌胚表面的菌状乳头数量明显增多;Wnt/β-catenin信号通路的下游关键基因AXIN2、LEF1和CCND1以及核内激活性β-catenin蛋白的表达均显著提高。最后利用免疫荧光技术检测增殖细胞的标志蛋白Ki67与神经纤维的标志蛋白PGP9.5,结果表明提高Wnt/β-catenin信号活性使人舌早期菌状乳头增多与细胞增殖无关,但增加了味觉神经纤维的数量。研究结果表明,CHIR-99021可提高人舌胚的Wnt/β-catenin信号通路活性,同时促进舌乳头数量的增加。此外,已有报道表明β-catenin基因在舌癌组织中异常表达。因此,本研究第二部分首先收集成人舌癌组织和癌旁正常组织,通过免疫组织化学和Western Blot技术验证了β-catenin蛋白在舌癌组织中高表达;其次以舌癌细胞CAL 27为研究对象,探讨Wnt/β-catenin信号通路抑制剂,FH535小分子化合物对舌癌细胞的影响。结果显示,FH535处理CAL 27细胞后,核内激活β-catenin蛋白及Wnt/β-catenin信号通路的下游靶基因的表达量均降低;细胞的增殖、迁移和克隆形成能力均受到抑制;而细胞凋亡率显著升高;同时进一步研究发现,细胞的上皮-间充质转化(EMT)的上皮标志物E-cadherin的表达增加而细胞质标志物N-cadherin的表达降低。综上所述,Wnt/β-catenin信号通路人舌早期发育过程具有重要调控作用,而其在成体的异常表达与舌癌的形成相关,同时降低其信号活性对抑制舌癌细胞的增殖和转移具有重要作用。