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DHA(C22∶6,二十二碳六烯酸)是一种多不饱和脂肪酸,对人体健康有多种益处。裂殖壶菌是目前商业化发酵生产DHA的重要菌株,本论文从菌种选育、DPA/DPA比例调控、类胡萝卜素和角鲨烯含量调控等方面对裂殖壶菌进行了研究,结果如下: (1)油脂高产株的选育。裂殖壶菌的高油脂含量是裂殖壶菌高DHA产量的前提。本研究以紫外线为诱变方法,以基于尼罗红染色法的高通量筛选为初筛方法,以摇瓶培养、油脂提取为复筛方法,得到了可高产油脂且性状稳定的裂殖壶菌B4D1。相对于出发株裂殖壶菌SR21,突变株裂殖壶菌B4D1的油脂产量提升了31.30%,油脂含量提升了17.38%。这部分研究证实了尼罗红染色可用于裂殖壶菌的高通量筛选,从而降低菌种选育时的工作量。 (2) DPA/DHA比例的调控。DPA/DHA比例一般维持稳定,但本研究发现一些培养条件会改变DPA/DHA比例,即对DHA和DPA合成有不同的影响。其中,延滞期、低温、奇数碳短链脂肪酸可降低DPA/DHA比例,高温、碘乙酰胺可提高DPA/DHA比例。DPA/DHA比例的变化可指示出DPA、DHA合成差异所在,因此可以推测出DPA特殊的合成机制:FAS先合成了一段饱和脂酰辅酶A,然后PUFA合成酶吸收这个饱和脂酰CoA为前体,合成了DPA。另外,对裂殖壶菌油脂中DPA/DHA比例调控有助于拓宽裂殖壶菌油脂的潜在适用范围。 (3)类胡萝卜素、角鲨烯含量的调控。当在培养基中添加丁醇、巴豆醇、丙醇等短链脂肪醇时,裂殖壶菌油脂中不饱和脂肪酸的含量会有大幅度的下降,其中DHA含量的最大下降幅度可达到53.54%。DHA等多不饱和脂肪酸含量的减少也使得甲羟戊酸途径代谢通量的增加。培养基中有醇存在时,裂殖壶菌菌体的颜色由几乎无色变为橙黄色,表明其色素含量增加,同时,裂殖壶菌油脂中角鲨烯的含量由0.60mg/g最高增加至10.50mg/g。这部分研究证实了裂殖壶菌具有高产角鲨烯的能力。