【摘 要】
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目的:调节人视网膜色素上皮细胞中葡萄糖转运蛋白的基因表达,探讨下调葡萄糖转运蛋白相关基因表达的可能。方法:采用基因编辑系统对人源视网膜ARPE-19宿主细胞进行相应的基因
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目的:调节人视网膜色素上皮细胞中葡萄糖转运蛋白的基因表达,探讨下调葡萄糖转运蛋白相关基因表达的可能。方法:采用基因编辑系统对人源视网膜ARPE-19宿主细胞进行相应的基因编辑,运用Crispr Cas 9基因编辑系统对细胞中的葡萄糖转运蛋白基因进行敲除,并且对细胞中的目标基因葡萄糖转运蛋白的基因编辑效率进行验证,考察基因编辑系统在人视网膜色素上皮中的编辑效果。结果:实现了葡萄糖转运蛋白相关基因的敲除,完成了人源视网膜色素上皮细胞ARPE-19基因缺陷型单克隆细胞株的构建。结论:利用Crispr Cas9技术对视网膜细胞的内源性基因进行编辑,有可能作为基因治疗糖尿病性视网膜病变的新策略。我们证实了设计的针对葡萄糖转运蛋白的sgRNA可以准确靶向并定点切割目标基因,并且这种治疗策略在细胞学方面是安全有效的。使用sgRNA对内源葡萄糖转运蛋白基因进行了敲除是具有治疗意义的,从根本上解决了糖尿病性视网膜病变眼内葡萄糖蓄积而产生的各种细胞损害,是一种潜在的治疗糖尿病性视网膜病变的手段。
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