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迟发型超敏反应是抗原诱导的T细胞免疫应答,效应T细胞主要是CD4+Th1细胞,引起以单核细胞浸润,细胞坏死,组织红肿损伤为主要特征的炎症反应。迟发型超敏反应发生较慢,通常在接触相同抗原24-72小时后出现炎症反应。迟发型超敏反应是公共健康面临的重要挑战之一,据统计,全世界约有15%-20%的人口患有此种疾病。玉屏风散是由黄芪、白术和防风三味中药组成,对于特异性免疫和非特异性免疫都有一定的调节作用。大量研究表明,玉屏风散可用于治疗迟发型超敏反应,但是其作用机制却鲜见报道。首先,以迟发型超敏反应为切入点,结合中药网络药理学分析方法,构建与迟发型超敏反应相关的蛋白质-蛋白质相互作用网络模型和玉屏风散有效成分-蛋白质相互作用网络模型,通过整合上述两种模型,进而构建与迟发型超敏反应相关的玉屏风散有效成分-靶点相互作用网络模型。结果发现,HSP90AA1、 HSD17B1、ESR、NR3C1、TTR等可能是其中的关键节点蛋白。从YPFS有效成分的潜在靶点所富集的信号通路来看,YPFS有效成分可能通过MAPK和NF-kB信号通路发挥作用。通过潜在靶点的连接度分析,发现HSP90AA1的连接度最高,说明其可能是比较重要的靶点。将YPFS有效成分与潜在靶点进行分子对接,进一步探索YPFS有效成分与HSP90相互作用的机制。结果表明,HSP90的TYR1 39侧链上的羟基可能是主要的氢键供体,PHE138的苯环可能是关键的疏水相互作用基团。其次,构建二四二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型超敏反应模型,围绕HSP90AA1进行实验验证。实验结果表明,迟发型超敏反应小鼠血清中,IFN-γ含量显著增加,YPFS及其有效成分能显著降低IFN-γ含量。迟发型超敏反应小鼠脾脏中,IL-1p的表达量升高,YPFS及其有效成分能降低IL-1p含量。初步发现,迟发型超敏反应小鼠中HSP90AA1的蛋白量增加,YPFS及其有效成分能够降低HSP90AA1的蛋白量。这说明HSP90AA1可能是玉屏风散治疗迟发型超敏反应的潜在作用靶点。最后,在IL-1β(15ng/mL)诱导下,小鼠巨噬细胞RAW264.7中HSP90AA1和IRAK-1的蛋白量增加。当IL-1p刺激48h时,HSP90AA1和IRAK-1的蛋白量达到峰值。25mg/L升麻素苷(Pg)和三种有效成分的组合：5mg/L黄芪甲苷(AsIV)、3.33mg/L白术内酯(AtI)、10mg/L升麻素苷(Pg)能降低IL-1β(15ng/mL)诱导的RAW264.7细胞中HSP90AA1和IRAK-1蛋白量。这说明HSP90AA1作为分子伴侣,可能通过调节客户蛋白IRAK-1的稳定性发挥调节作用。综上所述,HSP90AA1可能是玉屏风散治疗迟发型超敏反应的潜在靶点,可能通过调节客户蛋白IRAK-1的稳定性发挥调节作用。