沙眼衣原体F血清型感染孕鼠导致不良妊娠结局及致病机理的初步研究

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目的:1通过建立沙眼衣原体F血清型感染孕鼠生殖道模型,了解生殖道衣原体F型感染对小鼠妊娠结局的影响。2了解沙眼衣原体感染孕鼠的妊娠结局与体内的Th1型,Th2型细胞因子水平的关系,并了解阿奇霉素干预治疗对其免疫状态及妊娠结局的影响,探讨沙眼衣原体致不良妊娠结局的免疫机理。研究方法:将所有孕鼠随机分成三组,于孕2,3,4天,对照组A组阴道内接种无感染衣原体的McCoy细胞制备的SPG悬液30ul,实验组B组阴道内接种1.0×10 6 IFU/ml沙眼衣原体F型株的SPG悬液30ul,实验组C组在阴道接种衣原体后于妊娠第8天腹腔注射阿齐霉素10mg/kg(单次给药)。孕12天用酶联免疫法检测各组小鼠血清中Th1型( IFN-γ、TNF-α) / Th2型( IL-4、IL-10)细胞因子表达水平,并计算IL-4 /TNF-α,IL-10 /TNF-α比值。用方差分析和χ2检验比较三组的妊娠失败率,胚胎吸收率,胎重,孕期体重增加量等。并比较三组之间细胞因子的水平及TH1/TH2型免疫调节平衡的比值等。结果:1实验组B组即生殖道接种沙眼衣原体F型株小鼠妊娠失败率实验组为50%显著高,对照组A组13.3%。反复妊娠失败率实验组B组为22%与对照组A组0相比,差异有显著性;实验组C组即阿奇霉素干预组的妊娠失败率及反复妊娠失败率较B组低而较A组高,对比实验组A有所下降,但无显著性差异(P > 0. 05 )反复妊娠失败率下降明显,差异有显著性( P < 0. 05 )。2胚胎吸收率,胚重,孕期体重增加量三组相比差异无显著性。3接种沙眼衣原体组较对照组体内Th2型细胞因子下降(IL-10),而Th1型细胞因子上升(TNF-α),且IL-4 /TNF-α,IL-10 /TNF-α比值实验组显著高于对照组,形成Th1型免疫偏倚。阿奇霉素组干预治疗降低了妊娠失败率并降低了Th1型免疫偏倚程度。结论:1本实验成功培养了引起人类非淋菌性尿道炎的沙眼衣原体F血清型,并进行扩增,测序和计数。2本实验首次成功使用沙眼衣原体F血清型感染孕鼠生殖道建立动物模型,来评价沙眼衣原体对孕鼠的妊娠结局的影响,以及研究孕鼠体内免疫状况,来探讨沙眼衣原体的致病机理。说明使用衣原体F血清型感染孕鼠建立动物模型作为实验方法是可行的。3沙眼衣原体F血清型阴道内接种可导致孕鼠妊娠失败率及反复妊娠失败率升高,而对胚胎吸收率,胚重,孕期体重增加量无明显影响。阿奇霉素干预后可以降低反复妊娠失败率,而对妊娠失败率无明显改善。4构建沙眼衣原体F血清型接种孕鼠能够诱导体内产生特异性细胞免疫和体液免疫,其中细胞免疫水平更显著,以Thl反应占优势,Th1型细胞因子具有胚胎毒作用,能妨碍早期胚胎的发育,引起妊娠丢失,导致不良妊娠结局。阿奇霉素干预可以降低这种偏倚程度,从而改善了妊娠结局。揭示了沙眼衣原体致不良妊娠结局的致病机理。
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