纳豆激酶肠溶胶囊的制备及其抗血栓作用的研究

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纳豆是一种具有上千年历史的的日本的发酵食品。现代药理学研究表明,纳豆中含有溶解血栓的生物活性物质即纳豆激酶。纳豆激酶是一种单链蛋白质,理化性质稳定而且口服有效。但是,纳豆激酶在胃酸中会很快失去活性。为了提高纳豆激酶的稳定性,我们制备了纳豆,提取了纳豆激酶,并采用喷雾干燥的方法,以蔗糖为添加剂,制备了纳豆激酶粉末。之后,将纳豆激酶粉末装入肠溶胶囊,即得到了纳豆激酶的肠溶胶囊,并评价了其抗血栓作用。我们结合我们的实验室条件,建立了如下纳豆制备工艺:选择色泽金黄无黑斑的东北大豆,室温浸泡12小时。蒸锅蒸熟,自沸腾算时间,需要大约20分钟。在超净工作台中,每500克熟黄豆接种5克纳豆,搅拌均匀,分装于不锈钢盆(深10厘米)中,厚度约3厘米,用双层无菌湿毛巾覆盖。转移到40土2℃恒温箱中,恒温箱内放置无菌水以维持适度的湿度。恒温培育36小时,于超净工作台中,搅匀分装于微型泡沫盒中,每盒50克,盒盖有细小针孔,盒子内纳豆表面覆盖食品包装用塑料薄膜。放置接近零度的冷藏箱中,熟化1周,即得拉丝很长的纳豆。纳豆制备的条件中,温度和湿度是关键。纳豆经过熟化后,会产生大量粘稠蛋白,纳豆激酶存在于粘蛋白中,因而很难提取。因此,我们采用刚制备出来的纳豆在熟化前,提取纳豆激酶粗提取物以消除纳豆粘蛋白的干扰。然后,采用昆明种小白鼠和SD大鼠,评价了纳豆激酶肠溶胶囊的抗血栓作用及其对动物凝血时间的影响。根据血液凝固时间与血液浓度相关,即血液浓度越低,血液凝固时间越长的原理,我们观察了纳豆激酶肠溶胶囊对血栓形成的影响。结果表明,可以采用日本纳豆作为菌种,用中国大豆制备纳豆。动物试验表明,纳豆激酶肠溶胶囊具有显著的抗血栓租用,而且不延长动物的出血时间,明显优于纳豆激酶。纳豆激酶能够干扰血栓形成,导致体外形成的血栓疏松。体外血栓形成试验表明,服用纳豆激酶肠溶胶囊的动物的血栓上部颜色浅甚至白色,沉淀红血球数量比较大,对照组血栓上部颜色深红,沉淀红血球数量比较少,说明纳豆激酶肠溶胶囊能够减慢血栓形成速度。总之,纳豆激酶肠溶胶囊能够抑制血栓形成,同时几乎不影响出血时间,有可能成为一种高效而且不良反应很少的抗血栓的新药。
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