应用从中国鲎血液中分离提取的小分子多肽——中国鲎鲎素处理人肝癌SMMC-7721细胞，以分化诱导剂HMBA处理为平行对照，并应用鲎素与HMBA组合进行处理，运用细胞生物学、免疫生物学、生物化学与分子生物学等手段，观察鉴定中国鲎鲎素对人肝癌细胞的生物学效应，并进一步研究鲎素对人肝癌细胞的作用机理。 实验结果表明，3.0ug／mL鲎素、5.0mmol／L HMBA和1.5ug／mL 鲎素+2.0mmol／L HMBA均能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖活动，细胞生长受到抑制，分裂指数下降，集落形成能力降低。生化测定、细胞化学与免疫细胞化学观察显示，经鲎素、HMBA及其组合处理后的SMMC-7721细胞甲胎蛋白和增殖细胞核抗原表达均明显降低，γ-GT和碱性磷酸酶活性明显减弱，而TAT酶活性显著增强。光镜、扫描电镜和透射电镜观察显示经鲎素、HMBA及其组合处理后的SMMC-7721细胞趋于扁平铺展状态，细胞体积增大，核质比例减小；核形状较为规则，核仁数量减少、体积变小，核内常染色质增多而异染色质减少；细胞质内线粒体数量增多、线粒体嵴发达，高尔基体较为典型，粗糙型内质网增多，多聚核糖体减少而游离核糖体增多；细胞表面微绒毛较少，边缘丝状伪足减少而片状伪足增多，表现出明显不同于对照组细胞而与正常细胞相似的形态与超微结构特征。光镜、共聚焦显微镜与免疫荧光观察显示SMMC-7721细胞经鲎素、HMBA及其组合处理后，细胞骨架排列较为有序，微丝减少而微管、中间纤维增加；细胞核骨架纤维排列有序，通过核纤层与中间纤维一起形成贯穿细胞核质的完整的致密网状骨架体系。流式细胞仪检测显示SMMC-7721细胞经鲎素、HMBA及其组合处理后，S期细胞均明显减少，Go／Gl期细胞明显增多，细胞被阻滞于G／G1期。免疫细胞化学与核酸原位杂交检测显示，鲎素、HMBA及其组合均能不同程度地上调SMMC-7721细胞p21WA／：I／CIPl、p16蛋白表达并增强p21WAFI／CIPl mRNA表达，下调突变型p53、Cyclin D1、CDK4、Rb、c-myc蛋白含量并降低c-myc mRNA表达，同时也能有效降低NF-K B、PKC、p185蛋白表达，对bc1-2蛋白表达也具有微弱的下调作用，但不影响TGF-p RⅡ蛋白表达。 研究结果表明，鲎素与分化诱导剂HMBA一样能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞恶性增殖活动，改变人肝癌细胞代谢相关酶活性和肿瘤相关抗原表达，逆转人肝癌细胞的恶性形态与超微结构特征，改变人肝癌细胞骨架与核骨架的构型特征，并将肝癌细胞停滞于G／G，期，从而对人肝癌细胞具有显著的诱导分化作用。其诱导肝癌细胞分化的作用机理与其调节和干预突变型p53、c－myc等癌基因、p21“”“”’小l6等抑癌基因的表达、调控受体酪氨酸激酶P185蛋白介导的RTK干肪信号传导通路以及G蛋白介导的DG－PKC磷脂酞肌醇等细胞信号传导通路具有密切关系。同时低浓度的HMBA与低浓度的鲨素联合应用，可有效降低鲨素或HMBA的作用浓度，并增强其对人肝癌细胞的诱导分化效应。