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鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）感染能造成雏鸭高死亡率,给世界各国养鸭业造成巨大损失。本研究成功制备了RA脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）单克隆抗体,并用于对RA LPS突变株筛选、鉴定及其生物学特性分析。共筛选获得2株LPS突变株,并对突变株的免疫效果作了评估。本研究结果表明完整的LPS结构对RA的毒力是必需的。本研究包括以下3部分内容:本试验旨在研制鸭疫里默氏杆菌脂多糖（LPS）单克隆抗体。将鸭疫里默氏杆菌CH3作为免疫原免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,将热酚水法抽提的CH3 LPS作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行3次亚克隆后制备小鼠腹水单克隆抗体。共获得2株稳定分泌鸭疫里默氏杆菌CH3 LPS单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为7H1和8A9。2株单克隆抗体均为Ig G1亚类。腹水单克隆抗体ELISA效价分别为1:12800和1:6400。应用玻片凝集试验和悬浮荧光试验检测2株单克隆抗体与国内流行血清型1、2和10型鸭疫里默氏杆菌菌株的反应性,结果表明2株单抗与血清1型菌株WJ4发生特异性反应,而与鸭疫里默氏杆菌血清2型菌株NJ-3及血清10型菌株HXb2无反应性。本研究成功制备了稳定性好、特异性强的LPS单克隆抗体,为筛选RA LPS缺失株和分析RA LPS的结构提供了保障。本研究中,用RA LPS单抗8A9筛选RA转座子随机突变库,获得突变株CH3?M9491556,间接ELISA试验表明该突变株与单抗8A9呈阴性反应。动物试验表明该突变株半数致死量（LD50）大于1010CFU,较野生株CH3（LD50=2×108）减毒50倍以上。突变株CH3?M9491556感染雏鸭血液载菌量与野生株感染雏鸭相比显著下降。突变株CH3?M9491556对于体外补体介导的杀菌作用较CH3更敏感。另外,CH3?M9491556对Vero细胞的粘附、入侵能力增强。CH3?M9491556油乳剂灭活苗免疫雏鸭后能对RA血清1型（WJ4）、血清2型（Yb2）及血清10型（HXb2）菌株产生较强的保护力,证明突变株CH3?M9491556能对RA血清1、2、10型产生广谱保护作用。试验结果表明M9491556基因与RA的抗原性和致病性相关。本研究中,用RA LPS单抗8A9筛选RA转座子随机突变库,获得突变株RA-M1,对其鉴定后发现突变基因是编码糖基转移酶的M9491603基因。基因分布检测表明该基因为RA血清1型菌株所特有。间接ELISA试验中该突变株不与脂多糖单抗8A9反应。与抗RA CH3兔血清进行Western blotting试验,结果显示RA-M1 LPS与CH3 LPS相比,代表LPS O抗原部分的梯状条带出现了缺失现象。与野生株CH3相比,RA-M1毒力显著下降、对血清杀菌更敏感。另外,我们对RA-M1灭活疫苗的交叉保护效果进行了评估。二次免疫后对血清1型（WJ4）、血清2型（Yb2）和血清10型（HXb2）强毒攻击产生100%的保护率,且心、肝、脾和脑组织均无剖检病变。抗体效价检测表明免疫后针对三种攻毒菌株的ELISA效价均可高达1:12800;细胞因子检测结果表明免疫鸭血清中白介素2（IL-2）和白介素4（IL-4）的产生水平升高,而γ干扰素（IFN-γ）的水平降低。试验结果表明M9491603基因为血清1型型特异性基因,该基因与RA LPS的O-抗原合成相关。RA-M1可用作新型疫苗候选株。