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泰妙菌素（Tiamulin,TML）是一种半合成的双萜烯类兽用抗生素,主要用于治疗鸡慢性呼吸道疾病。TML的规范使用会很好的发挥其抗菌效果,但若滥用TML就会在动物源性食品中残留,进而对人们的健康造成潜在的危害,引发食品安全与公共卫生问题。检测TML常用的的方法有色谱法、免疫学技术等。其中,免疫学检测中的试纸检测方法因其具有敏感、特异、快速、简便、且可实现现场实时检测的优点被广泛应用。高特异性、高亲和力的单克隆抗体的制备,是建立TML免疫学检测方法的基础。本研究根据TML的结构特点对TML五元环上的酮羰基进行改造并合成人工完全抗原;免疫小鼠;通过细胞融合技术与有限稀释亚克隆技术研制出高特异性、高敏感性和高亲和力的抗TML单克隆抗体,建立能稳定分泌抗TML单克隆抗体的细胞株,为建立快速检测TML的免疫学方法奠定基础。用肟化法与活性酯法,将泰妙菌素（TML）与载体蛋白（BSA）偶联,制备免疫原TML-BSA。同法制备包被原TML-OVA。对制备的人工完全抗原进行紫外线扫描（UV）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定。免疫Balb/c小鼠的结果表明:2号小鼠的免疫效果最好,其免疫血清的效价为1:1×105,半数抑制浓度(IC50)为4.07ng/mL。利用细胞融合技术和有限稀释法亚克隆,筛选出1株阳性杂交瘤细胞株,命名为4A7。用体内诱生法制备腹水,并用辛酸-硫酸铵法纯化,获得单克隆抗体,SDS-PAGE结果表明纯化后抗体有两条带,一条为IgG的重链,大小为50kDa,一条为IgG的轻链,大小为25kDa,纯度约为90%,间接ELISA结果显示纯化后效价可达1:5.12×105,IC50为0.049ng/mL,亲和力常数Kaff为1.47×109L/mol。且该抗体与沃尼妙林、氟罗沙星等其他抗生素均无交叉反应,与瑞他帕林有2.7%的交叉反应率。本研究制备了抗TML的单克隆抗体,为TML免疫学检测试剂盒以及相关快速检测产品的开发和研制打下基础。