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目的: 开发能治疗应激诱导的雄性性功能减退的药物。 方法: 1. 急性束缚应激对睾丸间质细胞功能的影响 建立束缚应激动物模型，对照组（6只），试验组:束缚应激0h组（6只），束缚应激0.5h组（6只）、束缚应激1h组（6只）、束缚应激3h组（6只）、束缚应激6h组（6只）; 睾丸内注入糖皮质激素受体拮抗剂RU486，并将24只大鼠分成4组:对照组，睾丸注入RU486的非应激组，应激组和睾丸注入RU486的应激组; Q-PCR检测垂体和睾丸中基因的表达情况; Western blot法检测StAR蛋白和类固醇合成酶的水平; 放射免疫法测定体内类固醇激素的水平。 2. 脱氢表雄酮(DHEA)对手术应激抑制雄性大鼠睾酮产生的拮抗作用 动物急性应激模型的建立:①非DHEA处理组:对照组（6只）、手术应激组0h（6只）、手术应激组1h（6只）、手术应激3h（6只）、手术应激6h（6只）;②DHEA处理组:大鼠在手术应激前1分钟灌胃5mg/kg剂量DHEA，然后分为对照组（6只）、手术应激组0h（6只），手术应激组1h（6只）、手术应激3h（6只）、手术应激6h（6只）; 分离睾丸间质细胞和肝脏细胞; DHEA刺激睾丸间质细胞和肝脏细胞的11β-HSD1氧化酶活性的检测; DHEA抑制上述细胞的11β-HSD1还原酶活性的检测; Q-PCR检测睾丸、垂体中基因的表达情况; 放射免疫法测定体外类固醇激素的水平。 3. 化学合成3类能抑制11β-HSD1的DHEA样的姜黄素衍生物 化学合成3类DHEA样的单羰基姜黄素衍生物; 检测3类DHEA样的单羰基姜黄素衍生物的生物活性，研究对人肝脏和大鼠睾丸微粒体中11β-HSD1氧化还原酶的影响。 结果: 1.1 束缚应激过程，应激大鼠血清皮质醇水平比对照组明显增加，而血清LH水平变化不明显，然而，应激3-6小时后大鼠血清睾酮水平显著低于对照组。 1.2 从细胞实验显示，束缚应激不能抑制基础睾酮生产，但显著地抑制LH、22R-OH胆固醇和LH加22R-OH胆固醇介导的睾酮合成。 1.3 RU486能使应激介导的抑制睾酮生产恢复。 1.4 Q-PCR结果显示，束缚应激1小时之后，Scarb1（P＜0.001)，Star(P＜0.01)和Cyp17a1（P＜0.05）明显下调;其他类固醇生成基因，包括类固醇合成酶Cyp11a1（P＜0.01），Hsd3b1（P＜0.05）和Hsd17b3(P＜0.001)，以及LH受体Lhcgr(P＜0.001)，在应激3小时后显著下调;应激6小时后，大多数基因的表达水平持续降低(Lhcgr, Scarb1，Star, Cyp11a1，Hsd3b1，Cyp17a1，Hsd17b3)。而应激时垂体Lhb、Gnrh、雌激素受体(Esr1)和Nr3c1水平无改变。 1.5 Western blot结果显示，应激1、3、6小时的StAR蛋白表达下调（P＜0.05，P＜0.05，P＜0.001)。在应激的第一个小时内，胆固醇转运蛋白(Scarb1和Star)（图6）和类固醇合成酶(Cyp17a1，图7)显著下降，随后类固醇合成酶(Cyp11a1，Hsd3b1和Hsd17b3)也显著下降。与对照组相比，CYP17A1蛋白的表达（图7）在应激1、3小时后有统计学差异（P＜0.05，P＜0.001）。HSD3B1蛋白的表达在应激1、3小时后有统计学差异（P匀小于0.05），HSD17B3的表达无统计学差异（图7）。 1.6 类固醇合成酶活性结果显示，应激1到6小时StAR蛋白水平和CYP17A1活性显著下调。在应激3小时内HSD3B1活性降低。 2.1 与手术对照组相比，在手术应激前1分钟口服5mg/kg的DHEA，拮抗手术介导的睾酮水平下降及Star、Hsd3b1、Cyp17a1的mRNA表达下降。5mg/kg剂量对手术应激组的Lhcgr, Scarb1，Star, Cyp11a1，Hsd3b1，Cyp17a1，Hsd17b3，Insl3的mRNA水平有明显增加作用（图8）。但是，DHEA处理对垂体的基因表达无影响（图9）。 2.2 DHEA刺激睾丸间质细胞的11β-HSD1氧化酶活性，对肝细胞的11β-HSD1氧化酶活性无影响。DHEA抑制睾丸间质细胞的11β-HSD1还原酶活性，抑制肝细胞的11β-HSD1还原酶活性。 2.3 手术诱导应激后1、3、6小时后，血清皮质醇水平显著增加，而应激后3、6小时开始，血清睾酮水平显著降低。 3.1 刺激11β HSD1氧化酶活性和抑制还原酶活性以戊烷二烯酮类似物的还原酶活性显著。 结论: 急性束缚应激能引起大鼠机体糖皮质激素显著升高，使睾酮水平明显下降;而糖皮质激素受体拮抗剂RU486能逆转应激诱导糖皮质激素升高引起的睾酮的下降。DHEA能激活11βHSD1氧化酶活性和抑制还原酶活性，从而使有活性的糖皮质激素水平下降而使睾酮水平恢复。刺激11βHSD1氧化酶活性和抑制还原酶活性以戊烷二烯酮类似物的还原酶活性显著。