【摘 要】
：
传统观点认为,神经元是终末分化的细胞,已经退出细胞周期,不再具有分裂的能力。而本室前期研究发现,神经元在一定条件下是可以分裂的。探究神经元脱离细胞周期的分子机理具有重要的理论与实践意义。我们希望从MageD1与MageH1这对序列相似而表达分布不同的分子上为神经元脱离细胞周期作出有益的注解。MageD1与MageH1分子同属于MAGEⅡ类蛋白家族,两者序列高度相似。MageD1主要分布于未分化的细
论文部分内容阅读
传统观点认为,神经元是终末分化的细胞,已经退出细胞周期,不再具有分裂的能力。而本室前期研究发现,神经元在一定条件下是可以分裂的。探究神经元脱离细胞周期的分子机理具有重要的理论与实践意义。我们希望从MageD1与MageH1这对序列相似而表达分布不同的分子上为神经元脱离细胞周期作出有益的注解。MageD1与MageH1分子同属于MAGEⅡ类蛋白家族,两者序列高度相似。MageD1主要分布于未分化的细胞,MageH1主要分布于终末分化的细胞,在神经系统内主要表达于终末分化的神经元。MageH1的N端90-194aa与Necdin功能结构域高度同源,已有研究表明Necdin有抑制细胞增殖的作用,由于Necdin在神经系统中主要表达于终末分化的神经元细胞,因此认为Necdin有维持神经元静息的功能。推测MageH1可能具有类似Necdin的功能。本论文主要围绕MageH1分子对细胞周期的影响展开研究。为了深入研究MageH1的功能,我们首先预测得到MageH1的优势抗原表位,构建了优势抗原表位原核表达载体,诱导表达纯化该蛋白,制备了针对MageH1优势抗原表位的多克隆抗体。本室前期研究发现,MageH1的瞬时表达可对PC12细胞产生明显的G0-G1期阻滞。构建了MageH1不同截短体N1-89aa、N1-194aa、N90-194aa、N90-218aa、N195-218aa及全长蛋白N1-218aa真核表达载体,转染PC12细胞,检测细胞周期,结果显示,N1-194aa、N90-194aa、N90-218aa及MageH1全长蛋白对PC12细胞有明显的G0-G1期阻滞,这说明,MageH1阻滞细胞周期的功能结构域为N90-194aa,即MAGE同源结构域。为了研究MageH1在胞内发挥功能的可能途径,我们通过酵母双杂交实验筛选到了MageH1相互作用蛋白MAPKK1,并用Co-IP手段进行了初步验证。由于ERK1/2的正常磷酸化激活是细胞度过G0-G1期进入S期的前提,而前期实验结果显示MageH1可阻滞细胞进入S期,且MAPKK1是ERK1/2的上游激酶,因此推测MageH1可能通过与MAPKK1相互作用而影响了ERK1/2的磷酸化,从而阻滞了细胞周期进程。利用本室G418筛选得到的能稳定表达MageH1的PC12细胞,比较了该细胞与正常PC12细胞在NGF诱导下不同时间点上ERK1/2磷酸化激活的强度差异,Western Blot检测发现,二者之间无明显差异,这表明MageH1对ERK1/2的磷酸化状态并无影响。为进一步研究MageH1在神经元脱离细胞周期中的作用,我们构建了针对MageH1的慢病毒干涉载体,为下一步包装慢病毒干涉MageH1以观察神经元是否可以重新进入细胞周期奠定了基础。
其他文献
肿瘤血管靶向治疗的策略由来已久,它通过抑制肿瘤的新生血管生成来阻断肿瘤组织养分的供给,达到抑制肿瘤的生长的目的。这种治疗方案具有毒副作用小、不会产生抗药性、广谱性等优点。整合素家族是一类细胞粘附分子,整合素αvβ3在肿瘤血管发生和肿瘤的迁移中发挥重要的作用。整合素的单克隆抗体可以通过竞争性占据受体和配体结合的部位,阻碍整合素和配体的结合,抑制整合素发挥促肿瘤血管生成和肿瘤扩散的作用。组织因子是体内
防疫期间,"停课不停教、停课不停学"给全国高校的教育教学带来了一定的挑战。笔者基于某高校线上教学质量报告及网课平台的数据统计,以及疫情期间线上教学平台的使用、教师教学情况、学生学习状况、教学管理等方面数据的分析发现,虽然线上教学给教师和学生带来了全新体验,但同时也暴露出缺乏形式新颖的教学设计、学生自我管理难以把控等问题。后疫情时代高校还将面临教育理念、教学平台、教学方式等的全新变革。本文针对高校线
在素质教育的推进下，科学作为小学素质教育中一门关键的学科，为了保证小学科学课堂的教学效果，促进学生科学素养的提升，教师要改变对于科学这门学科的教学观念和教学模式，将理论与实验进行结合。实验教学作为小学科学课堂中的重要组成部分，通过实验教学能够让学生的创新思维和科学素养得到提升，深化学生对于科学知识的理解。为了保证实验教学的效果，教师可以应用趣味实验来丰富教学内容。基于此，本文针对小学科学课堂趣味实
雌激素受体（estrogen receptor, ER）是核受体超级家族成员之一,主要调节与雌激素相关的基因转录,在乳腺癌的发生发展过程中起着重要作用。目前认为,ER是乳腺癌治疗的靶标和预后的指标之一。ER包括两种亚型:ERα和ERβ,二者都由A、B、C、D、E和F六个结构域组成,含两个转录激活区,即AF1和AF2。AF1具有雌激素不依赖的转录激活功能,位于A/B区;AF2具有雌激素依赖的转录激活
本文在文献［１］的基础上，引入工程辐射势的概念，建立了一个一般情况下辐射传热的二阶微分方程的数学模型。该方程具有一般传输方程的特点，使得工业过程中辐射传热的处理与传导、对流问题的处理在方法上相一致。
RNA编辑（RNA editing）是在初始转录本上插入、’删除或替换单个或多个核苷酸从而改变原遗传信息的过程,是一种重要的转录后调控事件。目前两种碱基替换类型的RNA编辑研究较多,分别是广泛存在于真核高等生物中的A-to-IRNA编辑事件与广泛存在于高等植物线粒体中的C-to-U RNA编辑事件。近几年,哺乳动物体内的A-to-I RNA编辑现象引起广大科学工作者的关注。它是指ADAR （ade
端粒的生物学功能主要是保护染色体末端,避免核酸酶对染色体末端的降解,防止染色体之间发生融合和重排,在维持基因组结构的完整性和稳定上起重要作用。端粒酶由端粒酶逆转录酶（Telomerase Reverse Transcriptase, TERT）和端粒酶RNA （Telomerase RNA component , TR或TER）模板组成的具有特殊逆转录活性的核糖核蛋白复合物。它以自身RNA为模板通
目的:MicroRNAs （miRNAs）是近年来发现的一类长度为～21nt的内源、单链的非编码小RNA,在生物体内发挥着重要的调控功能。到目前为止已有4000多个miRNA被陆续发现,它们广泛地存在于55个物种中。尽管有研究给出人、果蝇和线虫miRNA的数量估计,分别不超过255、110和120个,然而,有证据表明miRNA的数量远远超出这一估计,还有大量的miRNA有待发现。miRNA的发现主
雌激素类化合物是防治急性放射病的有效药物之一,如国内研制的523、E838等,因此我们推测雌激素信号途径中的组成成分应与辐射防护相关。目前公认的是,雌激素通过与雌激素受体（ER）起作用,调节ER的转录活性,这一过程受一类称为ER共调节因子的蛋白质的平衡调节,因此我们推测ER共调节因子在辐射防护中可能起重要作用,我们尝试了多种ER共调节因子与辐射应答相关的可能性,如FHL1、FHL3、RPBMS、P
猫泛白细胞减少症是一种由猫泛白细胞减少症病毒引起的,猫科动物常见的接触性传染病,临床发病率和死亡率均较高,疫苗免疫接种是预防和控制该病最经济、最直接的措施。然而,国内几无商业化宠物疫苗,特别是猫用疫苗,国外疫苗进口困难,亟需开发新型宠物用高效疫苗。对国内外猫泛白细胞减少症疫苗现状及不同类型疫苗（灭活疫苗、减毒活疫苗等）的优缺点进行了综述与分析,以期为我国猫泛白细胞减少症疫苗的研发提供参考。