莲心碱增强p27基因表达对膀胱癌T24细胞S周期的影响

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目的:研究莲心碱(Liensinine)作用于膀胱癌T24后,对膀胱癌T24细胞周期的影响,进一步探讨莲心碱对膀胱癌T24细胞周期影响的作用机制。方法:用浓度分别为(1.562、3.125、6.250、12.500、25.000μg/μL)的莲心碱溶液,处理膀胱癌T24细胞,通过CCK-8法与克隆形成实验的结果,了解莲心碱对T24细胞增殖的影响;通过流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染法,检测莲心碱对膀胱癌T24细胞周期的影响;使用Western blot技术分析莲心碱对细胞周期相关抑癌基因p27表达的影响。结果:(1)CCK-8法检测结果表明:随药物浓度的增加及孵育时间的延长,莲心碱各加药组相对于对照组表现出明显的增殖抑制作用。莲心碱作用48 h后,T24细胞增殖抑制率分别为(8.79±0.07)%、(16.11±0.05)%、(21.05±0.07)%、(27.79±0.05)%、(41.46±0.04)%,差异有统计学意义(p<0.05)。(2)克隆形成实验结果显示:莲心碱对膀胱癌细胞T24的增殖具有明显的抑制作用,莲心碱作用于膀胱癌T24细胞7 d后,克隆抑制率分别为(20.34±0.32)%、(57.95±0.19)%、(89.98±0.45)%、(94.22±0.02)%、(95.16±0.01)%,结果具有统计学意义(p<0.05)(3)流式细胞术检测细胞周期的结果提示:与对照组相比,莲心碱可抑制膀胱癌T24细胞增殖并阻滞在S期,膀胱癌T24细胞在不同浓度莲心碱作用后,其细胞S期比率明显增加,对照组及1.562、3.125、6.250、12.500、25.000μg/mL各莲心碱组细胞S期所占比例分别为(34.03±0.85)%、(35.49±2.41)%、(37.89±0.55)%、(41.29±1.18)%、(54.48±1.93)%、(58.78±0.38)%,结果具有统计学意义(p<0.05);(4)Western blot相关检测结果显示:莲心碱组与对照组相比:抑癌基因p27明显上调并呈现剂量依赖效应,莲心碱增强膀胱癌T24细胞抑癌基因p27表达并促进其活化。结论:莲心碱可抑制膀胱癌T24细胞增殖并将T24细胞增殖阻滞在细胞S期,其作用机制可能与抑癌基因p27上调有关。
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