细菌性腹泻疾病对全球人类健康具有重大影响,肠出血性大肠杆菌作为引起腹泻的病原菌之一,可以在受感染的人中引起腹泻、出血性结肠炎、溶血性尿毒综合症甚至死亡。而抗生素治疗是肠出血性大肠杆菌感染治疗的禁忌,会刺激细菌产生更多的志贺毒素并增加溶血性尿毒综合症的发生风险。当前的治疗策略是减少抗生素的使用,同时积极开发新的抗菌疗法,例如抗体,抗菌肽,噬菌体,益生菌及抗毒力药物等。侧重于剥夺病原菌的毒力而不是抑制它们的生长或杀死细菌的抗毒力治疗相比抗生素疗法可以降低耐药菌产生的概率。为了更好的开发抗毒力治疗这一新型抗菌疗法,对毒力因子特别是新型毒力因子的认识还需增强。论文主要围绕新型毒力因子OMV中已发现蛋白的分泌机制、OMV内容物鉴定和OMV功能探究三方面进行研究。首先以OMV中已发现的一个分泌蛋白为研究对象进行该蛋白的分泌机制探究。通过构建包含该分泌蛋白编码区不同区域的载体,对其分泌上清和OMV提取液的免疫印迹鉴定初步探索该蛋白上的相关功能域。随后运用免疫印迹方法,在OMV提取液中检测到相关蛋白,并进一步对OMV递送蛋白与T3SS的联系进行探究。最后,运用巨噬细胞吞噬检测模型、细菌黏附测定模型、细菌pedestal形成观察模型、细菌蛋白转运发生检测模型探究OMV功能。本研究在EHEC OMV提取液中鉴定到转运蛋白及效应蛋白,并且发现相关蛋白输出到OMV与T3SS有一定的关联,研究也表明EHEC OMV对缺陷株的黏附能力、pedestal形成和蛋白转运发生均起到一定回补作用。通过对新型毒力因子OMV的相关研究,可以深化对肠出血性大肠杆菌毒力和致病机制的认识,并为缓解细菌感染及开发新颖有效的抗菌疗法提供思路。