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凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是一类重要的经济养殖品种,冬棚对虾养殖因其反季节养殖创造较高经济效益,广为养殖者青睐,而对虾养殖产量和健康状况很大程度上取决于水环境质量,水体环境由理化因子及生物因子构成,而细菌在水环境中具有重要作用。本研究以漳州市龙海玉江水产有限公司2个冬棚对虾养殖池为研究对象,于2015年11月至2016年3月对2个对虾养殖池水体的温度(T)、溶解氧(DO)、氨氮(NH4+-N)、氧化还原电位(ORP)、总氮(TN)、亚硝酸盐(NO2--N)、硫化物(HS-)、化学需氧量(COD)、叶绿素a(Chla)等理化因子进行了监测,采用PCR(polymerase chain reaction)-DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis)技术测定了水体细菌多样性,实时荧光定量PCR(qPCR)技术对条件致病菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)进行定量检测,结果表明:(1)养殖过程中,对虾死亡数与NO2--N呈显著负相关(P<0.05),与HS-呈显著正相关(P<0.05),DO、T与对虾相对死亡数相关性不显著(P>0.05),由于增氧机的开闭得当,没有成为对虾生长的限制因子,T在本研究中为非绝对性决定因子,水体T呈现出随环境温度变化而变化的趋势,与NH4+-N、COD、HS-呈现极显著负相关(P<0.01),与NO2--N呈显著正相关(P<0.05),与Chla呈显著负相关(P<0.05),HS-与COD、NH4+-N呈极显著正相关(P<0.01)。NH4+-N、COD与NO2--N、HS-呈显著甚至极显著相关关系,直接或间接影响对虾的生长,可通过适度调节棚内温度、适度降低投饵或者底部安装微孔增氧装置,达到降低底质COD和HS-的目的,促进对虾生长。(2)冬棚对虾养殖池水体细菌丰度呈现中后期(1-2月)>养殖末期(3月)>养殖初期(11-12月)。同一养殖池,采样时间上越相近的样品,其条带相似性系数越高。两个养殖池细菌多样性差异不显著(P>0.05)。菌群的香农-维那(Shannon–Wiener)多样性指数(H’)在1.60-2.76之间,两池分别平均为2.20,2.34。测序结果表明,各个时期优势菌群分属于未知原核生物、蓝细菌、α-变形菌纲、β-变形菌纲、变形菌门、放线菌门。冗余分析(redundancy analysis,RDA)结果表明,影响微生物菌群的理化因子主要有T、HS-、NO2--N和NH4+-N。(3)以qPCR技术对养殖各个时期水体副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)进行定量。定量分析结果表明,体系质粒浓度为1.08×107-1.08×102 copy/2μL,重复性检验CV<3%,重复性良好,副溶血弧菌检出限为1.08×102copy/2μL。标准品定量标准曲线为y=-2.91791x+38.27743,决定系数R2=0.9892。T、NO2--N与水体副溶血弧菌浓度呈极显著负相关(P<0.01),NH4+-N与水体副溶血弧菌浓度呈极显著正相关(P<0.01),对虾死亡数与水体副溶血弧菌浓度呈极显著正相关(P<0.01),HS-与水体副溶血弧菌浓度呈显著正相关(P<0.05)。