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第一部分Ⅰ型胶原在脂肪组织中表达的变化目的：Ⅰ型胶原（type I Collagen, Col I）是细胞外基质的重要成分之一，它在脂肪细胞外基质大量表达。但是它在脂肪组织表达的差异性尚无报道。本研究通过观察正常体重人和C57/BL6小鼠，及肥胖人体和高脂喂养诱导肥胖小鼠皮下脂肪与内脏脂肪组织中Ⅰ型胶原的表达，分析Ⅰ型胶原与肥胖之间的关系。材料与方法：选取5名正常体重和5名肥胖择期胆囊手术者及12只雄性C57/BL6小鼠其中普食对照组（NC）6只和高脂喂养组（HFD）6只的皮下脂肪和内脏脂肪组织，Westernblot方法检测皮下脂肪和内脏脂肪组织中Ⅰ型胶原的表达水平。并分析其与体重的关系。结果：1、Ⅰ型胶原在人和小鼠皮下脂肪及内脏脂肪组织中均有表达。2、肥胖患者内脏脂肪组织Ⅰ型胶原表达量低于皮下脂肪组织，并且均低于正常体重者内脏脂肪和皮下脂肪组织，差异具有统计学意义（P<0.05）。3、高脂喂养小鼠内脏脂肪组织Ⅰ型胶原表达量低于皮下脂肪组织，并且均低于普食对照组小鼠内脏脂肪和皮下脂肪组织，差异有统计学意义（P<0.05）。脂肪组织Ⅰ型胶原的表达与体重呈负相关关系。小结：1、Ⅰ型胶原在人和小鼠皮下脂肪及内脏脂肪组织中均有表达。2、肥胖者内脏脂肪组织Ⅰ型胶原表达较皮下脂肪降低，且均低于正常体重者。3、高脂喂养组小鼠内脏脂肪组织Ⅰ型胶原表达较皮下脂肪组织降低，且均显著低于普食对照组小鼠。脂肪组织Ⅰ型胶原的表达与体重呈负相关关系。第二部分Ⅰ型胶原对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响及其分子机制初探目的：观察Ⅰ型胶原（type I Collagen, Col I）对3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞进程的影响，并初步分析其可能的分子作用机制。材料与方法：3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中加入I型胶原，组织蛋白酶K（Cathepsin k,CTSK）,设立对照组（CON）、组织蛋白酶K处理组（CTSK）、I型胶原处理组（ColI）及I型胶原+组织蛋白酶K处理组（Col I+CTSK）。采用MTT法检测3T3-L1前脂肪细胞的增殖。油红O染色法观察分化成熟脂肪细胞形态学变化。Western blot和RT-PCR方法检测分化成熟脂肪细胞中I型胶原，分化转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ（Peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ）和CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer-binding protein α，C/EBPα）蛋白和mRNA的表达，比较各组间其mRNA和蛋白表达的差异。结果：1、不同浓度Ⅰ型胶原干预后，各组3T3-L1细胞增殖较对照组无显著变化。2、随Ⅰ型胶原浓度升高油红O染色逐渐变浅，提示分化成熟的脂肪细胞逐渐减少。3、分化成熟脂肪细胞中Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达水平随1型胶原浓度升高呈剂量依赖性升高，而分化转录因子PPARγ和C/EBP ɑ mRNA和蛋白表达水平呈剂量依赖性降低，且Ⅰ型胶原浓度为10-5mol/l和10-4mol/l时与对照组比较有统计学意义（P<0.05）。4、CTSK处理组较对照组油红O染色加深，提示分化成熟脂肪细胞增多。并且分化成熟脂肪细胞中Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达较对照组降低，而分化转录因子PPARγ和C/EBP ɑ mRNA和蛋白表达水平较对照组升高，差异存在统计学意义（P<0.05）。Ⅰ型胶原与组织蛋白酶K共同处理组，分化成熟脂肪细胞油红O染色较Ⅰ型胶原处理组变深，提示分化成熟脂肪细胞增多。并且分化成熟脂肪细胞中Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达较Ⅰ型胶原处理组降低， PPARγ和C/EBP ɑ mRNA和蛋白表达水平较Ⅰ型胶原处理组升高，差异存在统计学意义（P<0.05）。小结：1、Ⅰ型胶原在本实验中不影响3T3-L1前脂肪细胞增殖。2、Ⅰ型胶原呈剂量依赖性抑制3T3-L1前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化,下调分化转录因子PPARγ和C/EBPɑ的表达，同时伴随Ⅰ型胶原表达升高。3、组织蛋白酶K促进脂肪细胞分化，与Ⅰ型胶原共同干预后，分化成熟脂肪细胞Ⅰ型胶原，分化转录因子PPARγ和C/EBPɑ表达较Ⅰ型胶原处理组有显著差异。提示Ⅰ型胶原抑制脂肪细胞分化可能是通过下调分化转录因子PPARγ和C/EBPɑ的表达发挥作用的。结论1. Ⅰ型胶原在人和小鼠皮下脂肪及内脏脂肪组织中均有表达。在皮下脂肪的表达丰度高于内脏脂肪。2.肥胖人体和高脂喂养小鼠皮下脂肪和内脏脂肪组织Ⅰ型胶原表达较正常体重人体和普食对照组小鼠显著降低。3. Ⅰ型胶原与体重呈负相关关系。4. Ⅰ型胶原不影响3T3-L1前脂肪细胞增殖。5. Ⅰ型胶原呈剂量依赖性抑制3T3-L1前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化，可能通过下调脂肪细胞分化转录因子PPARγ和C/EBPɑ的表达发挥抑制脂肪细胞分化的作用。