金钱草中药效物质新型萃取检测方法研究

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金钱草为报春花科植物过路黄(Lysimachia christinae Hance)的干燥全草,有关金钱草的各种中药制剂和保健产品在临床上应用广泛,建立金钱草中药效成分的高效分离方法对保障临床用药安全意义重大。金钱草中大量与药效成分结构相似的化合物进入仪器,药效物质难以准确定量检测。只有采用合适的样品前处理技术对金钱草中的药效组分进行萃取、净化后才能实现其准确检测。本研究针对金钱草中的主要药效物质,开发了新型吸附剂;结合固相萃取技术和高效液相色谱法,实现了金钱草中药效物质的萃取分离和检测。主要研究内容如下:(1)基于分子印迹固相萃取的金钱草中药效物质质量控制新方法2020版《中国药典》中规定的金钱草药材质量控制指标成分为槲皮素和山奈酚,研究发现金丝桃苷对金钱草的质量控制同样具有十分重要的意义。金钱草基质复杂,需要采用合适的样品前处理技术对金钱草中的药效物质进行萃取分离后才能实现其准确检测。本工作结合分子印迹材料特异选择性强和介孔材料比表面积大的优势制备了3-氨基苯酚-乌洛托品-介孔硅印迹复合材料(HMIR-SBA-15),将其用作固相萃取的吸附剂,结合高效液相色谱(HPLC)法建立了金钱草中三种黄酮类化合物的检测方法,该方法在0.50–25.00μg m L-1的浓度范围内线性关系良好(r≥0.998),金丝桃苷、槲皮素、山奈酚的回收率在92.5–109.2%范围内,相对标准偏差(RSDs)≤5.2%(n=3)。本实验建立的方法可作为药典中金钱草质量控制方法的补充。(2)96孔板固相萃取-液相色谱法高通量筛选金钱草中抗高血脂成分药理学研究表明,金钱草具有降血脂的作用。研究发现,金钱草中具有抗高血脂作用的活性成分有三叶豆苷、橙皮素、橙皮苷和柚皮素。金钱草基质复杂,含有的化合物种类较多。为实现金钱草样品中抗高血脂活性成分的快速萃取和准确检测,本工作开发了树脂-氧化石墨烯复合材料(HNIR-GO)作为96孔板固相萃取技术的吸附剂,结合高效液相色谱法,建立了金钱草中四种黄酮类化合物的分离分析方法,实现了金钱草中抗高血脂活性成分的高通量萃取检测。该方法在0.25–25.00μg m L-1的浓度范围内具有良好的线性(r≥0.999),三叶豆苷、橙皮素、橙皮苷、柚皮素的回收率为77.7–91.6%,RSDs≤5.4%(n=3)。所建立的高通量筛选方法对金钱草中具有高效抗高血脂活性成分的快速筛查和新型抗高血脂药物的开发利用具有重要意义。
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