【摘 要】
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目的利用马钱子引起人类癫痫发作的性质,探索用马钱子碱来制备癫痫动物模型的可能性及方法学。在建立马钱子碱癫痫模型的基础上探讨凋亡调控基因之一的T细胞死亡相关基因51(T
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目的利用马钱子引起人类癫痫发作的性质,探索用马钱子碱来制备癫痫动物模型的可能性及方法学。在建立马钱子碱癫痫模型的基础上探讨凋亡调控基因之一的T细胞死亡相关基因51(T cell death-associated zene 51,TDAG51)蛋白表达的变化,以探讨在癫痫发生、发展过程中凋亡相关基因的改变。方法43只SD大鼠随机分为实验组(33只)、假模型组(5只)和对照组(5只)。分别采用单次和多次腹腔注射的方法予实验组大鼠以不同剂量的马钱子碱,注射前均需将马钱子碱溶于无水乙醇,再加入适量的生理盐水,无水乙醇与生理盐水混合比例为13:100,观察大鼠注射后的行为学变化。将实验组中有痫性发作且存活的的大鼠归为模型组,痫性发作后第7天用免疫组化法检测模型组大鼠皮质和海马微管相关蛋白2(Microtubule associated protein2,MAP2)的表达,并与假模型组(等量无水乙醇+生理盐水比例也为13:100)和对照组(等量生理盐水)比较。22只SD大鼠随机分为实验组(12只)、假模型组(5只)和对照组(5只),实验组以91mg/kg剂量,分次注射的方法复制马钱子碱诱导的大鼠癫痫模型,将各组中有痫性发作且存活的的大鼠归为模型组,痫性发作后第2天以免疫组化的方法分别检测模型组、假模型组、对照组大鼠皮质TDAG51的表达。结果实验发现接受单次腹腔注射91-110mg/kg马钱子碱的大鼠都有癫痫发作,剂量越大,出现癫痫发作的可能性越大,但死亡率极高,分次注射相同剂量的马钱子碱,死亡率下降。91mg/kg分次注射组和100mg/kg分次注射组的模型成功率无显著区别(P＞0.05)。对模型组鼠进行的MAP2测定发现其表达比假模型组和对照组明显升高(P＜0.05)。TDAG51主要表达在神经元的胞浆,与对照组和假模型组比较,模型组TDAG51的表达明显升高(P＜0.05)。结论(1)马钱子碱可以制备大鼠急性全身大发作模型,在本实验中其适宜剂量为91mg/kg-100mg/kg,方法为将一次总量平均分为三次腹腔注射,每次间隔时间为30分钟。(2)在马钱子碱诱导痫性发作后促凋亡基因TDAG51的蛋白表达明显增加,TDAG51的表达在癫痫发作后导致的神经元凋亡中可能起重要的作用。
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