在真核生物中,内质网作为最大的细胞器,与多种多样的膜性细胞器互作。其中,内质网-晚期内体/溶酶体通过形成膜接触位点发生细胞器互作的机制复杂,功能繁多。ORP1L在内质网-晚期内体/溶酶体膜接触位点形成过程中,发挥重要作用,而Rab7-RILP可能参与其中。另外,ORP1L是ORP蛋白家族成员之一,近年来研究较多,而与之结构相似的其他ORP蛋白家族成员功能则鲜有报道。在本研究中,我们通过免疫荧光和GST-Pull Down实验,系统地对ORP蛋白家族成员与Rab7/RILP/VAP-A的相互作用进行了鉴定,发现在Hela细胞中与Rab7/RILP/VAP-A均有较好共定位,同时与三者相互作用的ORP蛋白家族成员有:ORP1L、ORP3、ORP7、ORP10、ORP11。说明除ORP1L以外的4种蛋白也可能参与膜接触位点形成,调控内质网-晚期内体/溶酶体互作。其中ORP7的配体和所涉及的细胞器互作目前不得而知,因此,我们对ORP7的功能进行了初步探索。首先,我们在Hela细胞中过表达ORP7,发现ORP7与LAMP1和钙网蛋白共定位,说明ORP7可能定位于溶酶体和内质网。然后,通过免疫荧光和GST-Pull Down实验,发现ORP7的结构域FFAT与VAP-A和RILP-N发生互作,其结构域ORD与Rab7互作。并且发现,过表达ORP7时,会引起胞内胆固醇聚集,且ORP7仅含有ORD结构域的截短形式与胆固醇完全共定位,表明ORP7的结构域ORD可能参与胆固醇转运。进一步研究发现,当不同截短形式的ORP7分别与Rab7/RILP过表达时,ORD与Rab7和胆固醇共定位,FFAT与RILP和胆固醇共定位,暗示我们,ORP7可能通过Rab7/RILP参与内质网-晚期内体/溶酶体的膜接触位点形成,且调控胆固醇运输。此外,我们意外发现单独过表达RILP时,也会引起胆固醇聚集至RILP,因此,RILP在内质网与晚期内体/溶酶体细胞器互作中的作用值得深入探索。最后,我们发现,在高脂饮食诱导的肥胖小鼠中,ORP7在脑中高表达,在脂肪中相对于野生型小鼠,表达量明显降低。暗示我们ORP7可能与脑神经和肥胖密切相关。