丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及对TRB3表达的影响

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研究目的通过建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,用不同剂量的丙氨瑞林对移植瘤进行分段干预,观察TRB3基因对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的影响以及促性腺激素释放激素激动剂醋酸丙氨瑞林作用于肿瘤后TRB3基因表达情况。研究方法在4-6周龄雌性裸鼠右上肢近腋窝处皮下接种人子宫内膜癌细胞株HEC-1B,(这些人子宫内膜癌细胞株HEC-1B均于体外培养)。建立皮下移植瘤模型,建模后,将移植瘤体积最大和最小的两只裸鼠舍去。将余下的32只裸鼠随机分成4组,每组8只,即对照组(注生理盐水)、低剂量组、中剂量组和高剂量组。接种一周后开始给药,对照组肌肉注射0.2ml的生理盐水,低、中、高剂量组分别注入15、30、60μg/kg的丙氨瑞林0.2ml。每日给药1次,连续给药。在治疗期间,每隔7天测量计算裸鼠移植瘤体积,并绘制肿瘤生长曲线,观察裸鼠生长、生活状况。6周后,处死裸鼠,完整地取出移植瘤,称取瘤重,计算抑瘤率。以此来判断不同剂量的丙氨瑞林对肿瘤作用机制及TRB3基因表达的影响。实验结果:1.随着醋酸丙氨瑞林浓度的减少,移植瘤的生长曲线斜率依次增大,生长速度依次增快,差异有统计学意义(P<0.05);2.药物治疗6周后,各组移植瘤体积分别是:对照组为(1404.04±109.09)mm3,低剂量组(1219.40±158.97))mm3、中剂量组(1052.88±146.78)mm3、高剂量组(818.37±192.91)mm3,差异有统计学意义(P<0.05)。不同剂量醋酸丙氨瑞林均能明显抑制人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长。醋酸丙氨瑞林低、中、高剂量组的抑瘤率分别12.90±0.12%、25.05±0.08%、41.92±0.12%,组间两两相比较,差异有统计学意义(P<0.05);3.HE染色结果:对照组瘤细胞结构排列紊乱,异型性高,核大深染,核浆比例失调,核分裂相较多。而治疗组肿瘤细胞体积略大,量少,稀疏排列,肿瘤细胞深染,核固缩。4.免疫组织化学结果显示:醋酸丙氨瑞林可以降低裸鼠移植瘤组织中的TRB3表达水平,且随着醋酸丙氨瑞林剂量的不断增加,TRB3的表达逐渐降低(P<0.05),各组间两两比较差异均有显著统计学意义(P<0.05)。实验结论:1.丙氨瑞林可抑制人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长,且呈剂量依赖关系。2.丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤抑制作用的分子机制可能与下调TRB3蛋白表达有关。
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