基于抗菌肽的pH响应型抗菌水凝胶人工血管材料

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血栓形成和感染是制约永久移植型小直径人工血管临床应用的主要原因。已有不少研究持续关注提高人工血管材料的血液相容性,包括抗凝性、抗血栓性、低溶血率、抗血小板黏附等,而对人工血管的抗菌性关注较少。随着人工血管动静脉瘘临床应用的增长,感染问题日益凸显。理想的小直径人工血管应具有均匀可控的管径和结构稳定性,与天然血管相匹配的力学性能,良好的细胞相容性和血液相容性。作为血管通路的人工血管,抗菌性能也是不容忽视的。因此,本研究基于水凝胶人工血管材料,结合表面改性技术,设计并制备了一种细菌微环境响应的抗菌水凝胶人工血管材料,为小直径人工血管的临床应用提供理论基础与实践参考。本研究获得的主要结果与结论如下:(1)成功制备了聚乙烯醇/聚丙烯酰胺(PVA/PAAm)水凝胶材料,其弹性模量可达到0.49±0.01MPa,在天然动脉血管的力学性能范围内。并且,以涤纶单丝编织管内部增强制备了内直径为3 mm的小直径水凝胶人工血管材料。该人工血管材料表面光滑,结构均匀稳定,内部微孔结构均匀,体积溶胀率接近100%(不溶胀)。(2)对水凝胶人工血管材料进行抗菌改性。首先通过表面接枝聚合物刷并固定蜂毒肽(MLT)赋予材料抗菌能力。在抗菌表面共价结合屏蔽基团2,3-二甲基马来酸酐(DMMA),实现pH响应型抗菌策略并保持材料良好的生物相容性。化学结构分析结果表明每一步化学接枝成功实现。DMMA解离试验结果表明,获得的抗菌水凝胶材料具备pH响应抗菌能力。(3)对抗菌水凝胶人工血管材料进行了抗菌性能评价。结果表明,在生理状态下,DMMA能够屏蔽MLT的生物毒性,不具有杀菌能力。在细菌代谢的环境中,改性水凝胶表面由于pH的变化产生电荷逆转,可解除DMMA的屏蔽能力,从而使MLT表现出杀菌能力。(4)对抗菌水凝胶人工血管材料进行了体外细胞毒性与血液相容性的试验。结果表明,改性的水凝胶材料不具有细胞毒性。溶血率为0.16%,属于不溶血材料。凝血指数BIC<0.3,材料具有良好的抗凝性能。材料表面未见明显的血小板黏附与红细胞溶解。改性的抗菌水凝胶人工血管材料具有良好的细胞相容性和血液相容性,说明此材料是制备人工血管较理想的生物材料。综上所述,本研究制备的pH响应型抗菌水凝胶人工血管材料的性能结构稳定,力学性能优良,具有良好的细胞相容性和血液相容性。而且,具有细菌代谢微环境变化引起的pH变化响应能力,能够在低pH环境下表现出高效的抗菌性能。改性的抗菌水凝胶人工血管材料溶血率低,抗凝血性能优良,不易黏附血小板与红细胞。本研究为进一步开发抗菌水凝胶人工血管奠定了坚实的基础。
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