目的 MMPs是一类含Zn²⁺的蛋白酶类。主要功能是能够降解细胞外基质。其参与多种生理及病理过程。其在肿瘤的生长及浸润中的作用已被发现。本研究的目的是探讨MMP-2及其抑制剂TIMP-1在人类视网膜母细胞瘤中的表达状况。 方法 应用31例RB石蜡包埋标本及8例正常视网膜组织。MMP-2、TIMP—1试剂为兔抗人单克隆抗体，工作浓度1:50（博士德公司）。RB及正常组织石蜡标本行5μm厚的连续切片共5张，其中1张行HE染色光镜检查。参照文献根据肿瘤分化程度分为分化型组和未分化型组（即有菊花团为分化型，无菊花团为未分化型）；根据肿瘤浸润视神经的情况分为视神经浸润组和非浸润组。进行常规免疫组化染色。用乳腺癌标本作为阳性对照，PBS代替一抗染色作阴性对照。染色阳性信号呈棕黄色或棕褐色物质。MMP-2、TIMP-1均定位于癌细胞和少数间质细胞胞浆内。记数方法是：每张切片选取五个高倍视野（400×），累计计数不少于1000个细胞，计算阳性细胞的百分率，即标记指数（Labeling indexes，LIs）作为实验结果。应用SPSS10.0统计学软件进行独立样本的t检验和相关分析，P值按0.05计算。 结 果 三．正常视网膜 MMP一二和TIMP1在8例正常视网膜均未见表达。 2．HE常规染色撤下病理学特点 31例Rb患者年龄为2－53月，平均13．5月。其中分化型7例，肿瘤细胞较小，核大，国或类圆形、染色较深，间质中见散在核碎片。瘤细胞排列呈菊形团。未分化型24例，在细胞呈圆形、椭圆或梭形，胞质少、核大、深染，可见核分裂，细胞排列不规则。 3．＊＊P一二及＊＊P一的表达情况 ＊MMP－2一化组的表达高于分化组，有显著性差异河＜o．05h在视神经浸润组表达高于非浸润组，也有显著性差异什＜0·05)。 ＊TIMP一在未分化组的表达高于分化组，有显著性差异沙＜o．吓人在视神经浸润组表达高于非浸润组，也有显著性差异忏＜0·05)。 ＊MMP－2与TIMP－l之间存在一定的直线正相关关系。（r＝0．52） 讨 论 在视网膜母细胞瘤的研究中，目前较为公认的是二次突变论和抗癌基因论。抗癌基因论是指由于抗癌基因的失活而导致的细胞恶性变，即由于赐号染色体长臂1区4带缺失03ql4O。二次突变论是指一个正常细胞要通过两次突变才能演变成癌细胞。遗传型患者所有体细胞中均带有一次突变，其视网膜任何一个细胞只要再发生一次突变就可变成癌细胞6遗传型患者两次突变 ·2·均发生于一个视网膜细胞。 MMPs被发现参与人体的多种生理及病理过程。同时MMPS及其抑制剂TIMPS在肿瘤生长中的作用已经引起了科研工作者的关注。大量文献证实它们参与了肿瘤细胞的浸润。其表达程度与肿瘤的生长方式及恶性度相关。 在人视网膜母细胞瘤中，玻璃体内界膜及视网膜细胞间质的突破是肿瘤细胞生长中必需的。 在我们的研究中，MMP—2及TIMP一二在正常的视网膜组织中未见表达，而在RB中却有不同程度的表达。并且在不同的细胞分化程度分组及有无视神经浸润的分组中，存在着显著性的差异。MMP－2及TIMP一二在分化程度低及有视神经浸润的肿瘤细胞表达要高于分化程度高及无视神经浸润的细胞。在MMP与TIMP的相关性方面，二者成正相关。MMP－2作为肿瘤的促进因素，MMP一二的表达情况与理论上的推断相符。那么，如何看待lMP一二的表达呢？已有文献表明，TIMP在具有肿瘤抑制作用的同时，也有肿瘤促进作用。本实验中TIMP1在人视网膜母细胞瘤中究竟是起抑制作用还是促进作用呢？分析本实验的结果，TIMP的高表达可能反映了宿主控制MMP活性，对抗肿瘤侵袭的能力；只是因癌组织中 MMP在一定程度上比 TIMP过表达，故TIMP的增高不足以控制MMP的活性。MMP与TIMP成正相关也说明了这一点。TIMPJ在RB中的作用还有待于进一步研究。 结 论 本实验通过免疫组化的方法，研究了＊＊P－2及n＊P一二在人RB中的表达。我们发现二者在正常视网膜中无表达；同时，在人RB中，二者的表达与人RB细胞的不同分化程度和有无视神经浸润相关。提示其在RB的诊断及恶性程度的判断中可以有一定 ·3·的帮助作用。