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喜树(Camptotheca acuminata Decne.)为蓝果树科(Nyssaceae)落叶乔木,全株含抗肿瘤活性成分——喜树碱。本文以喜树为材料,就以下方面进行了研究:通过组织培养技术,成功地对其进行了喜树愈伤组织的诱导与继代,为以后的悬浮培养做了基础性工作;比较分析了我国十三个省区喜树果实中喜树碱(CPT)和10—羟基喜树碱(HCPT)含量变化规律,为选择喜树优势种源提供了依据;研究了喜树幼枝发育过程中各组织结构变化特别是分泌结构的变化,确定CPT在营养器官中的积累部位和分布规律,为提高CPT的产量和喜树优良品系的选育提供了科学依据。本实验的主要结果如下: 1.选取喜树各部分作为外植体进行愈伤组织的诱导,以芽、幼叶、幼茎为佳,尤以幼茎最佳。选取了BDS,MS两种基本培养基对外植体进行诱导,发现基本培养基对愈伤组织诱导率的影响不显著,但对其生长的影响较为显著,BDS基本培养基更有利于愈伤组织的生长。将NAA、2,4-D、6-BA、KT等生长调节物质分别附加在BDS基本培养基中进行单因子实验,愈伤组织白色、干燥、致密。选取NAA、2,4-D、6-BA、KT等4种生长调节物质以不同组合及浓度配比附加在BDS基本培养基中,结果表明,激素组合比单激素更能有效地诱导出愈伤组织,其中以BDS+2,4-D 1.0mg/L+KT0.6mg/L,BDS+2,4-D 1.5mg/L+KT0.6mg/L,BDS+2,4-D2.0mg/L+KT0.6mg/L的组合诱导效果最好,愈伤组织湿润、疏松,呈淡黄色。不同组合因子对愈伤组织继代培养的效应结果表明,BDS+2,4-D0.5mg/L+KT0.6mg/L是最佳的继代配方,其次为BDS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,BDS+NAA3.0mg/L+KT0.6mg/L,愈伤组织湿润、疏松,长势良好。 2.高效液相色谱法测定了采自于我国十三个省区喜树果实中喜树碱和10-羟基喜树碱的含量,发现福建的喜树果实中喜树碱含量最高,贵州的喜树果实中喜树碱含量最低,且差异极显著(P<0.01)。四川的喜树果实中10—羟基喜树碱含量最高,贵州的喜树果实中10—羟基喜树碱含量最低,且差异极显著(P<0.01)。分析同一省份(浙江)不同地区(杭州、金华、磐安)的喜树果实中喜树碱及10—羟基喜树碱含量发现,三者含量差异不显著。比较分析新鲜喜树果实与放置一年喜树果实中喜树碱及10—羟基喜树碱含量,一些产地的含量有差异,一些没有差异。分析喜树果实(果皮和种子)中喜树碱和10—羟基喜树碱的含量,