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多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)能产生多种抗菌物质,包括肽类、蛋白质类、核苷类、吡嗪类和酚类等,具有抗细菌、真菌、病毒的功能,能够防治多种植物病害。所产生的脂肽类抗菌物质是一种天然的广谱抗菌物质,安全、稳定在生物医药、食品、化妆品和农业等领域有巨大的应用潜力。然而,野生的菌种产量较低,使生产和回收成本增加,从而限制了其工业化生产,因此寻找能够提高产量、降低生产和回收成本的方法势在必行。本研究的目的在于,对本实验室保藏的抗菌肽产生菌Paenibacillus polymyxa JSa-9,通过抗生素诱变和原生质体融合的手段选育抗菌脂肽高产菌株,从而提高抗菌脂肽的产量。本研究主要结果包括以下几个方面：1.本研究选择多种抗生素如链霉素、庆大霉素、氯霉素、卡那霉素进行单一抗性筛选,以及链霉素-氯霉素、链霉素-卡那霉素的复合抗性筛选,确定了各抗生素的最适选育浓度,并筛选到88高产菌株,其中效果最好的是由庆大霉素复合诱变所得,其在保留时间25-30min时的峰面积相对于对照提高了40%。通过稳定实验,共得到8株性状稳定的高产株,将其进行原生质体融合实验。2.确定了最佳的培养条件：将亲本菌株进行二次液体活化,30℃,180rpm培养14-15h后收集菌体,制备原生质体。对Paenibacillus polymyxa C-2-1-113、C-2-1-102分别做了原生质体破壁及再生实验,通过实验确定亲本菌株原生质体制备条件：0.1mg/mL的溶菌酶,在37℃下作用7min。3.确定了热灭活条件以及紫外灭活条件：热灭活条件为沸水浴90min；紫外灭活150min(30W,20cm).确定最佳的融合条件：灭活后的原生质体在40%PEG6000,在pH9.0下,37℃水浴15min,融合率达到3.05×10-4。4.从360株融合子中通过初筛、复筛最后筛选出效果最好的一株融合子Paenibacillus polymyxa2-16,较原始菌株提高了41.01%。传十代后仍能较好地保留其发酵特性,是比较好的融合子。