膀胱出口部分梗阻（Partial bladder outlet obstruction, PBOO）可引起膀胱结构及功能的改变而导致膀胱过度活动症（Overactive bladder, OAB）。最近，卡哈尔间质细胞（Interstitial Cells of Cajal，ICCs）在OAB病理生理学中的作用越来越受到关注。这些间叶细胞样的细胞最先在胃肠道中被发现，被命名为肌成纤维细胞，ICCs或间质细胞（Interstitial Cells，ICs）。有研究表明，ICCs作为胃肠道慢波电流的起搏者和传导者，在神经肌肉信号传递中起重要的调节作用。组织学的证据显示，膀胱中的ICCs呈星网状分布且介于尿路上皮和神经末端之间，提示他们之间可能存在直接的信号传导。研究发现，ICCs在OAB患者中的数量明显增多，抑制ICCs可以减少平滑肌的收缩活动。另外，在PBOO中ICCs的超微结构也发生了改变。在1972年通过对豚鼠膀胱的研究发现，腺苷三磷酸（Adenosinetriphosphate, ATP）在膀胱的神经传递中起重要的作用。膀胱充盈和传入神经之间存在信号转导，在膀胱上皮受到牵拉时可以导致ATP的释放。研究证实，ATP受体亚型P2X₃在膀胱中与初级神经关联十分密切，并在神经传导中起关键的作用。P2X₃基因敲除小鼠在膀胱测压中表现出膀胱反射减退并随之产生膀胱充盈次数减少和膀胱容积增大。很多研究证实P2X₃受体在膀胱的机械感觉传导中起重要的作用，并参与排尿反射的过程，但很少有该受体在膀胱ICCs中的功能和表达的相关报道。我们前期的实验证实了膀胱上皮下的ICCs与传出神经之间有紧密的联系，在膀胱上皮下的ICCs中有大量的P2X₃受体表达。近期的一些研究也提示在膀胱过度活动的患者中可能存在异常的P2X₃受体介导的感觉信号。在本实验中，我们对P2X₃受体在PBOO大鼠膀胱ICCs中的表达及功能进行了研究，以期进一步了解该受体与PBOO导致的膀胱功能障碍之间的关联。目的探讨不同时间点P2X₃受体在PBOO大鼠膀胱ICCs中的表达及电生理特性。方法1．48只雌性大鼠随机分为四组：4，6，8周PBOO组及假手术对照组。利用膀胱内压测量法研究PBOO四周后大鼠膀胱功能变化。在4，6，8周后，处死大鼠收集膀胱标本用于实验。2．利用免疫荧光化学技术探究P2X₃受体在膀胱ICCs中的表达。3．应用聚合酶链反应（Reverse Transcription-PCR，RT-PCR）检测P2X₃受体mRNA的表达水平。4．用电生理学方法观察PBOO大鼠膀胱ICCs内向电流的变化。结果1．膀胱测压测量结果显示，与对照组相比较，PBOO大鼠膀胱最大逼尿肌压力明显上升；残余尿量显著增加；膀胱充盈体积减小；膀胱顺应性无明显改变。2．与对照组相比较，PBOO大鼠膀胱ICCs中P2X₃受体表达明显上调，呈时间依赖性。3．RT-PCR提示在4，6，8周PBOO大鼠膀胱ICCs中的P2X₃受体mRNA表达水平显著升高。4．膜片钳数据提示，PBOO后ICCs的内向电流平均峰值均高于对照组。结论本实验首次发现P2X₃受体在PBOO大鼠膀胱ICCs中表达明显升高，并呈时间依从性。P2X₃受体激动剂α, β-meATP使PBOO大鼠膀胱ICCs内向电流增强。证实了P2X₃受体在ICCs中表达及功能的改变与PBOO导致的膀胱功能障碍相关。这些结果为进一步认识P2X₃受体在膀胱功能障碍相关疾病中所扮演的角色及机制奠定了基础。