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周围神经横断伤是一类严重的损伤,会导致运动、感觉功能的完全丧失,严重影响患者的生活质量。神经导管桥接术对神经损伤修复有广阔的应用前景,可以通过控制管内的生物微环境促进神经的再生。多项研究表明给予神经再生有序的引导,并提供具有神经营养和保护功能的因子是促进再生的关键。
我们之前的工作证明,有序胶原材料(Linear ordered collagen scaffold,LOCS)具有很好的有序结构和生物相容性,可以作为引导神经有序再生的生长支架。另外层粘连蛋白对神经的再生有重要的支持作用,因此我们将层粘连蛋白通过化学交联的方法包被到有序胶原材料的表面,制备出层粘连蛋白包被的有序材料L×LOCS。然后我们以胶原膜为材料制备出可降解的神经导管,并通过化学交联反应来优化导管的机械支撑能力。
神经营养因子在外周神经损伤修复中也起着关键的作用。但目前在使用神经营养因子治疗神经损伤时,药物扩散问题是一个重要的技术障碍。由于体液的流动,外源施加的因子往往不能有效聚集在损伤部位,而会扩散到周围的正常组织,从而造成了治疗的低效率。为了在损伤部位获得一个有效的治疗浓度,就需要因子的重复给药。这种给药方式效率低,成本高,同时,扩散到周围正常组织的因子可能会引起不良效应。基于上述的问题,如何进行有针对性的靶向治疗,降低扩散导致的风险,减少成本是安全有效应用神经营养因子的关键。
如果因子具有与生物材料特异结合能力,它就可以靶向的锚定在生长支架上并发挥作用。基于这个工作设想,我们选取了睫状神经营养因子CNTF与脑源性神经营养因子BDNF,并对它们进行了基因工程的改造,使其具有与相应支架材料结合的能力。我们分别构建了带有胶原蛋白结合区的CBD-CNTF,CBD-BDNF,及带有层粘连蛋白结合区的LBC-CNTF,LBD-BDNF。在体外实验中,我们验证了重组蛋白的生物学活性及其与对应基质的靶向结合能力。然后将重组蛋白其相应的靶向材料结合,填充到神经导管中,制备获得功能支架材料;随后建立了大鼠坐骨神经及面神经横断伤模型,检测它们在体内神经损伤修复中的作用。经行为学、电生理、组织学等多项检测,结果证明我们制备的由靶向因子与有序支架组成的功能生物材料可以更好地促进神经的再生和功能的恢复,而靶向CNTF与靶向BDNF的联合应用可以得到更好的修复效果。