一、背景： 冠心病（CHD）是当今世界威胁人类健康的主要疾病之一，然而其发病机理迄今未明。多数学者认为凡涉及到动脉粥样硬化、血栓形成和血管收缩的因素均易致CHD的发生。eNOS是L-精氨酸、一氧化氮途径的关键酶。NO是所有硝基类扩血管药的活性成分，具有松弛血管平滑肌、舒张血管，并有抑制血小板聚集、粘附，抑制白细胞的趋化激活，抑制血管平滑肌细胞的增生、迁移及清除超氧自由基等重要作用。NO是心血管系统中抗冠状动脉粥样硬化、血栓形成，维持正常血管舒缩反应中必不可少的保护因子。生理状态下，血管内皮细胞能持续产生少量NO。NO产生量的减少或活性的下降均有可能参与CHD的发生与发展。因此，eNOS基因被列为CHD的一个侯选基因。有报道：人类血浆NO代谢产物水平与eNOS基因多态性相关。近来的研究发现内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因7外显子中的G894T突变和CHD的发病及其心肌梗塞（MI）风险有关。 二、研究目的： 我们应用聚合酶链反应（PCR）技术、限制性内切酶酶切分析和遗传学方法，测定了一组中国汉族正常人、CHD患者的eNOS基因G894T突变频率，并进行CHD经典危险因子和家族史调查，旨在探讨eNOS基因多态性和中国人CHD的发生及其MI风险的关系。 三、对象与方法： CHD患者106例，男74例、女32例，年龄65士10岁。病例符合1979年Vq4O诊断标准，58例经冠状动脉造影确诊。参照MONICA方案设计CHD登记调查表，对病例进行经典危险因子及心血管家族史调查。正常人 108例，男68例、女40例，年龄64士8岁。选自人群健康体检的随机个体。研究人群个体之间无血缘关系。 所有受检者采血前禁食12小时，次晨空腹抽取静脉血。以常规方法测定血总胆固醇、血甘袖三酯。以快速盐析法从全血中提取DNA。参考 Hingorani AD等设计引物，经 PCR扩增，207hp的 PCR产物用 Ban 11酶消化。当 894位等位基因为 G时，有单个的 Ban 11酶切位点。而当 894位等位基因为 T时，没有Banff酶切位点。PCR产物用 Banff酶消化后，GG基因型产生 125hp和 82hp两种片断，GT基因型产生 207hp、125hp和 82hp三种片断，TT基因型只有一个片断。酶切产物用3％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，紫外摄影，检测eNOS基因多态性。用基因计数法计算各组病例和正常人的基因型和等位基因频率。资料用 SPSS．0软件包作统计学分析。 四、结果： 1、经计算，正常对照组、CHD及其MI、AP亚组的基因型分布均符合 Hardyweinbeyg平衡。 2。中国汉族正常人群GG。GT。TT基因型频率分别为0．907、0．093和 0000；G、T等位基因频率分别为 0．954和 0刀46。 3、我们假设eNOS基因为显性遗传，其GT＋TT基因型频率与GG型相 比，CHD组、MI亚组均显著高于正常人（P均＜0．05），AP亚组与 正常人相比无显著差异（P＞0刀5）。上述各组T、G等位基因频率相比， ＊＊D组及＊1亚组均极显著高于正常人尸均＜0刀1），＊P亚组显著高 2 于正常人o＜0刀5）。 4、CHD患者MI组与AP组之间，eNOS基因型及等位基因频率差异 均无显著性o均＞0刀5）。 5、冠状动脉造影确诊的CHD患者eNOS基因GT＋TT基因型频率与GG 型相比，在单支、双支和多支血管病变组之间，差异均无显著性P 均＞0．05）。三组之间等位基因频率均无显著差异o均＞0刀5）。 6、CHD组eNOS基因G894T突变的基因型与CHD危险因子比较，可 见eNOS基因型GT＋TT与GG相比，和各危险因于之间无显著关系 p均＞0．05）。 7。CHD患者中有家族史组 GT＋TT型频率为 0．182，无家族史组 GT＋TT 型频率为0．219，与＊G相比，差异无显著性（P＞0．05）。两组等位基 因频率差异无显著性o＞O．05）。 五、结论： 1、中国汉族正常人eNOS基因G894T突变GG、GT、TT基因型频率分 别为0．907、0．093和0刀00刃和T等位基因频率分别为0．954和0．046。 2、中国汉族正常人GT＋TT基因型频率、T等位基因频率显著低于白种 人和日本人。 3、CNOS基因G894T突变与中国汉族人群CHD的发生有关。 4、eNOS基因G894T突变与CHD经典危险因子无关。eNOS基因G894T 突变可能是中国人CHD的一个独立的危险因于。 5、eNOS基因G894T突变与CHD病变血管支数无关。 6、eNOS基因G894T突变与中国人CHD患者心血管病家族史无关。