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NF-kB及其效应分子是天然免疫系统的重要组成部分，病原体感染机体以后，NF-kB信号通路激活产生效应分子积极清除病原体，同时NF-kB信号通路受到机体严密的调控，避免产生过多的炎症因子损伤免疫系统。长期以来关于NF-kB信号通路的研究一直是热点课题，尽管已经非常清楚NF-kB信号通路发生的基本过程，但是如何精细地调控NF-kB信号通路依然是个复杂问题，需要进一步研究和探索。通过生物信息学方法预测GM114和TRAF家族蛋白存在相互作用，有研究报道GM114是果蝇Bam蛋白的同源物，GM114-/-小鼠生殖功能是正常的，并没有发现GM114具备调控干细胞分化的能力，GM114属于KIZ家族，不同物种间KIZ蛋白高度保守，KIZ蛋白可以定位在中心体上，PLK1可以使KIZ发生磷酸化，从而促进细胞周期M期的发生。因此，我们对GM114新的功能产生兴趣，想知道GM114是否在NF-kB信号通路上具有调控作用。结果发现在Raw264.7和MEF细胞中分别敲低GM114表达可以促进NF-kB信号通路的发生，KIZ与GM114是同一家族，两者的同源性达到67％，敲低KIZ同样促进IL-1β激活的NF-kB信号通路，这说明GM114和KIZ的功能非常保守，敲低GM114并没有改变JNK和ERK磷酸化发生的时间，也不能促进TNFα激活的NF-kB信号通路，所以GM114特异性调控TLR4和IL-1β受体介导的NF-kB信号通路。 GM114参与了NF-kB信号通路的调控过程，敲低GM114可以促进NF-kB信号通路的激活过程，说明GM114可能是NF-kB信号通路上的负调控因子，那么GM114调控目标分子是什么，分子机制又是什么？过表达KIZ抑制NF-kBluciferase报告基因的表达，这种调控主要发生在IRAK1复合体上，免疫共沉淀结果进一步显示IRAK1可以促进Pellin2与GM114之间的相互作用， Pellino2是RING家族泛素连接酶，令人兴奋的是IRAK1不仅仅促进Pellino2同GM114之间的结合，还可以增强Pellino2对GM114的泛素化修饰，而IRAK1激酶失活型突变体不能增强Pellin2对GM114的泛素化修饰，说明Pellino2发生磷酸化修饰是个必要条件。Pellino2主要调控对象是IRAK1，过表达GM114抑制Pellino2对IRAK1的泛素化修饰，敲低GM114增强了内源IRAK1泛素化水平，因此GM114通过竞争Pellino2平衡IRAK1泛素化水平可以反向调控NF-kB信号通路。 果蝇Toll通路和哺乳动物NF-kB信号通路高度保守，果蝇的Pellino和哺乳动物的Pellino2之间同源性最高，可以达到56％，那么在果蝇体内Pellino是否可以发挥类似的功能？通过体外细胞实验发现Pellino是个负调控因子，敲低Pellino的表达可以促进Toll的激活过程，提高Drosomycin的表达水平，过表达Pellino反过来抑制Drosal mRNA水平，说明Pellino可以负向调控Toll信号通路。MyD88是Toll通路上的关键组分，它定位在细胞膜上可以募集更多的效应分子参与激活信号通路，当Toll信号通路激活以后可以诱导Pellino通过MyD88向细胞膜上聚集，Pellino是RING家族泛素连接酶，MyD88招募Pellino可以形成K48位泛素链，从而影响了MyD88的稳定性，敲低Pellino的表达降低了MyD88泛素化水平，增强MyD88的稳定性。因此在果蝇体内Pellino通过MyD88形成一个负反馈调节通路负控制Toll信号通路，从而保证激活信号适度有序的进行。