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背景与目的背景:创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)合并失血性休克(hemorrhagic shock,HS)时伤势严重复杂,病情变化迅速,致伤24h内的死亡率高达56%,早期及时有效的液体复苏对挽救患者生命起着至关重要的作用。目前常用的复苏液体存在一些弊端,晶体液的大量输注会引起细胞外水肿、酸中毒等;有研究发现普通胶体液会引起凝血机制障碍的风险,并不能改善患者预后,尤其是对脑组织的保护作用不明显。理想的液体复苏应在维持机体重要脏器灌注的同时减轻脑水肿,延缓原发性神经损害,阻止继发性损伤。各国学者都在积极探索较为适宜的复苏策略,Hwabejire J O采用新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma,FFP)复苏脑损伤合并失血性休克猪模型发现FFP通过改善脑灌注,减少谷氨酸盐介导的神经毒性发挥脑保护作用。富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)较新鲜冰冻血浆富含大量的血小板及生长因子,广泛应用于心脏外科手术及骨组织和软组织的缺损修复等,一些研究还发现富血小板血浆对神经挤压损伤具有治疗作用。但PRP作为复苏液体对TBI合并HS的效果及对脑保护作用尚不明确。本研究采用PRP治疗TBI合并HS大鼠,评估对脑水肿、血脑屏障功能、血流动力学、损伤区炎症因子、动脉血气及对海马区域神经细胞生存状况的影响。目的:探讨富血小板血浆对脑损伤合并失血性休克大鼠的脑保护作用。材料与方法125只雌性成年的健康的SD大鼠,选取其中25只分别制备新鲜冰冻血浆和采用Aghaloo法制备富血小板血浆,并分别检测两者理化指标;将100只健康成年雌性SD大鼠随机分为4组,每组25只:假手术组(sham组),生理盐水复苏组(vehicle组),新鲜冰冻血浆复苏组(FFP组),富血小板血浆复苏组(PRP组);sham组仅开放颅骨骨窗,余三组采用Feeney改良法制作创伤性颅脑损伤模型,结合Wiggers改良法制作失血性休克模型。模型制作完成60min后,vehicle组复苏采用3倍失血量的生理盐水,FFP组、PRP组分别给予同量失血量FFP与PRP进行复苏。复苏期检测大鼠血流动力学、血气情况;比较复苏后24h生存率,血脑屏障通透性检测采用伊文氏蓝(EB)染色法,Elisa测定炎症因子IL-1、IL-6及TNF-β的表达及干湿重法测量脑水肿;m NSS评分及平衡木实验检测大鼠神经功能障碍改善情况,复苏后7d时尼氏染色脑组织切片观察海马CA3区神经元细胞生存。结果大鼠富血小板血浆中血小板浓度为(1857.9±278.30)×109/L,是大鼠全血血小板的6.14倍。vehicle组复苏90min时MAP为25mm Hg,PRP组保持在70mm Hg左右,FFP组为66mm Hg,低于PRP组(F=46.00,p≤0.05)。血气分析比较发现90min时PRP组血乳酸为2.90 mmol/L,低于vehicle组(4.55 mmol/L)与FFP组(3.8 mmol/L)(F=152.10,p≤0.05)。24h大鼠生存分析结果显示sham组、vehicle组生存率分别为100%、39.70%,FFP组、PRP组生存率分别为63.89%、78.78%,高于vehicle组(p≤0.05)。复苏后24h时各组IL-1表达FFP组、PRP组明显低于vehicle组,PRP组与FFP组相比IL-1表达呈下降趋势(t=82.343,p≤0.05);IL-6表达PRP组低于FFP组、vehicle组(t=10.98,p≤0.05);TNF-β表达PRP组明显低于vehicle组(t=4.274,p≤0.05)。复苏24h时vehicle组EB含量为sham组约9倍(t=38.20,p≤0.05),PRP组EB含量明显低于FFP组(t=10.65,p≤0.05);在复苏后1d各实验组脑组织含水量明显低于vehicle组(F=134.12,p≤0.05)。m NSS评分、平衡木实验结果显示7d时PRP组优于FFP组与vehicle组(p≤0.05)。尼氏染色发现vehicle组、FFP组海马CA3区神经元稀疏,紊乱排列、胞周空泡化、胞体肿胀,而PRP组神经元细胞数量增多、空泡化减少,排列有序。结论采用富血小板血浆对脑损伤合并失血性休克大鼠进行复苏可以维持血流动力学稳定,降低血乳酸,提高生存率,减少炎症因子IL-1、IL-6及TNF-β表达,降低血脑屏障通透性,减轻脑组织水肿,改善神经功能,具有神经保护作用。