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目的:运用超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)技术监测丹参干预兔肾缺血再灌注损伤(renal ischemia reperfusion injury,RIRI)前后肾皮质血流灌注特点,探讨CEUS在诊断RIRI及评估丹参干预RIRI疗效的应用价值。方法:健康新西兰家兔63只,体重2.2kg～2.6kg,随机分为假手术组(R0),术后缺血60min后再灌注2h组(R1)、16h组(R2)、24h组(R3),术前2d给以丹参干预缺血60min后再灌注2h组(R4)、16h组(R5),24h组(R6)每组9只。实验所用63只家兔术前12小时禁食,4小时禁水。实验家兔手术的全身麻醉用速眠新Ⅱ于家兔腿部肌肉丰富处注射,剂量为0.2-0.3ml/kg。术前用二维超声标记出兔肾位置。剪除兔肾区毛并使用酒精消毒后做无菌手术操作。R0组只切除右肾,游离左肾后不做任何其他处理,关腹,正常进食饮水。R1～R6组的54只家兔被切除右肾并分离左肾,分离时小心保护好输尿管,左肾动脉被无创动脉夹夹闭60min造成缺血,兔左肾缺血成功的表现为左肾颜色由鲜红色变成暗紫红色,后松开动脉夹造成再灌注,左肾再灌注成功的表现为左肾颜色由暗紫红色变成鲜红色,缺血再灌注时间由此计算,切口无活动性出血再关腹,正常进食饮水。对R4,R5,R6组家兔,在造肾RIRI模型前两天开始每日给予丹参1.5g/kg肌肉注射干预;同时对R0～R3组家兔,在造肾缺血再灌注损伤模型前两天开始每日给予生理盐水1.5g/kg肌肉注射干预。术后于各时间点对每组家兔行CEUS监测肾血流灌注情况并储存造影动态影像6min,经仪器内的定量分析软件(wash in/wash out)进行分析时间—强度曲线参数(time intensity curve,TIC)。参数包括灌注峰值时间(time to peak,TTP)其由肾皮质开始增强到造影剂灌注达峰值的时间;灌注峰值强度(Peak Intensity,PI)是曲线达峰值时回声强度的灰阶值,反映单位时间造影剂到达此切面的最大剂量,与组织灌注量相关;曲线下面积(Area under curve,Area)与肾组织的血流量为线性相关性;曲线上升支斜率(gradient between start frame to peak frame,Grad)反映局部组织的灌注速率。各组超声造影检查结束后经兔耳缘静脉注入30mL空气处死家兔,取左肾皮质组织行病理切片HE染色。以病理切片结果作为参照,分析并判断R0～R6组不同阶段超声造影肾皮质血流灌注的特点及与肾病理损伤程度的相关性。结果:实验家兔麻醉效果良好,成功造模。(1)TIC参数分析:①R1、R2、R3组与R0组相比,TTP和Area增加、Grad降低(P<0.05),R3组PI值较R0组降低(P<0.05),差异有统计学意义,R1、R2组PI值较R0组降低(P>0.05),差异无统计学意义。R1、R2、R3组TTP、Grad及Area各组间差异有统计学意义(P<0.05),其中R3组TTP的延长、Grad的下降及Area的增加最为显著;R1、R2、R3各组间PI值差异无统计学意义(P>0.05)。②R4、R5、R6各组与R0组相比,Grad降低、Area增加和TTP的延长(P<0.05),R4、R5、R6各组PI值与R0组及相应R1、R2、R3各组间比较无统计学意义(P>0.05);经药物干预后TTP缩短、Grad上升较相应未干预组有统计学意义(P<0.05),R4组Area值与R1组比较有统计学意义(P<0.05),R5、R6组Area值与相应时间点R2、R3组比较无统计学意义(P>0.05)。(2)病理组织结果:①肉眼观察R0组肾脏形态大小未见明显变化,镜下观察肾小管排列较整齐,肾小管上皮细胞无坏死脱落,间质无充血水肿及炎性细胞渗出;②IRI组随时间延长病理改变加重,肉眼观察肾皮髓质不同程度肿胀,镜下观察近端肾小管排列紊乱,管腔扩张,损伤较严重者可出现空泡样变性、片状坏死及上皮细胞出现核固缩、核深染,甚至可见细胞管型脱落于管腔,间质内炎细胞浸润及充血水肿;然而肾缺血再灌注损伤前后肾小球未出现明显的改变;③丹参干预后IRI各R4、R5、R6组,肉眼观察肾皮髓质肿胀程度较缺血再灌注组相应时间点肾皮髓质肿胀程度有所减轻,镜下观察仅见少数上皮细胞变性坏死,部分肾小管上皮细胞再生,管腔内仅可见少量细胞管型,细胞核增大,染色质浓缩,间质水肿,间质充血水肿减轻且见少量中性粒细胞及单核细胞等炎性细胞浸润。结论:(1)CEUS能监测丹参干预后兔肾血流灌注的改变,从而在一定程度上反映其疗效,有望能为临床医师评估药物疗效提供新方法。(2)CEUS能够动态、无创、实时的观察RIRI的血流灌注特征,早期即可准确地提示RIRI的进展,这样可以及时指导临床医生实施治疗方案。(3)TIC曲线定量分析得到的各个参数对评价局部微循环灌注特征具有参考价值。(4)CEUS定量分析技术,安全简便,准确性高,并能提高对低流量、低流速血流的显示能力,有望成为一种安全、快速、有效的反映肾功能状况检查方法。