不同温度下松浦镜鲤幼鱼蛋白质需求量的研究

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试验研究了松浦镜鲤幼鱼(10.11±1.07)在3种生长温度(18℃、23℃、28℃)下,饲喂5种蛋白质水平饲料(30%、32%、34%、36%、38%)的生长性能、非特异性免疫、血清生化、消化酶活性和IGF-Ⅰ、Hsp70及Wap65基因表达差异。试验随机分成15组,每组3个重复,每个重复30尾鱼。每天定时投喂3次,每次投喂以饱食无残饵为准。实验为期60d,饥饿24h后测定体重,统计饲料重。采样,测肝脏重、内脏重,计算相关的生长指标;采血用于血清生化指标测定;取肠道用于消化酶活性测定;剪取脑和肝脏组织用于IGF-I、Hsp70及Wap65基因表达的研究。结果显示,同一蛋白质条件下,鱼体的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)随着水温的升高而显著增加(P<0.05),且23℃幼鱼的蛋白质效率(PER)均值高于其它温度组;18℃下,饲喂5种蛋白组的幼鱼的肝指数(HIS)和脏指数(VI)值均大于23℃和28℃;血清补体3(C3)、补体4(C4)、免疫球蛋白M(IgM),肝脏过氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及溶菌酶(LSZ)活性随着温度的升高而显著增加(P<0.05);随温度的升高,血清甘油三酯(TG)、血清尿素氮(BUN)、酐(CREA)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)和血清谷草转氨酶(AST)含量显著下降(P>0.05),血清碱性磷酸酶(ALP)含量显著上升(P<0.05)。23℃下血清葡糖糖(GLU)、r-谷氨酰转肽酶(GGT)含量显著高于其他两个温度组(P<0.05)。蛋白酶和淀粉酶活性随温度升高而显著升高(P<0.05),而脂肪酶活性则随温度的升高而显著下降(P<0.05);实时定量PCR研究结果显示,胰岛素样生长因子-I(IGF-I)、温暖温度适应蛋白(Wap65)基因在幼鱼的脑和肝脏组织的表达水平均随着温度的升高而显著提高(P<0.05),而热休克蛋白(Hsp70)基因则相反,18℃表达量最大,23℃表达量最低。在3种生长温度(18℃、23℃、28℃)条件下,幼鱼的WGR和SGR随饲料蛋白水平的升高先增大后降低,并分别在32%、38%和36%蛋白水平达到最大值;血清C3、C4、IgM,肝脏SOD、MDA以及LSZ活性随着饲料蛋白质水平的升高先显著增加(P<0.05),后有所降低;18℃条件下,TP和TG含量随饲料蛋白质水平升高而升高,AST含量则相反;各个蛋白组间血清总胆固醇(CHOL)浓度差异不显著(P>0.05),BUN、CREA、GLU、ALB、ALT和ALP含量分别随饲料蛋白质水平的升高而先升高后降低;蛋白水平对蛋白酶和前肠淀粉酶影响显著(P<0.05);随饲料蛋白质水平升高,肠道蛋白酶活性显著升高(P<0.05),肠道淀粉酶和脂肪酶活性有所升高但差异不显著(P>0.05);饲喂38%蛋白组的幼鱼的IGF-I基因在两种组织的表达量显著高于30%蛋白组(P<0.05),而其它饲喂组与之差异不显著(P>0.05);Wap65基因表达随饲料蛋白质水平升高显著升高,达到一定蛋白质水平后各个蛋白质组间差异不显著(P>0.05),而Hsp70基因表达随饲料蛋白质水平升高先显著降低达到一定蛋白质水平后差异不显著(P>0.05)。结论:1.根据SGR及FE,镜鲤幼鱼最佳蛋白质水平18℃下为34.32%~34.78%,23℃下为35.44%~35.51%,28℃下为36.23%~37.12%。2.适宜的蛋白质水平可提高镜鲤非特异性免疫力,根据血清IgM以及肝脏LSZ活性,镜鲤幼鱼最佳蛋白质水平18℃下为34.81%~35.45%,23℃下为35.23%~36.49%,28℃下为36.02%~36.43%。3.23℃比18℃,28℃更有利于镜鲤的营养代谢,根据血清生化指标,18℃,23℃和28℃下,松浦镜鲤幼鱼饲料最适蛋白质的水平分别为32%,34%和34%。4.适宜的蛋白质水平可提高镜鲤幼鱼IGF-I及Wap65基因表达量,促进幼鱼生长。根据IGF-I、Hsp70及Wap65基因表达,镜鲤幼鱼最佳蛋白质水平18℃下为32%,23℃下为36%,28℃下为36%。综上所述,镜鲤幼鱼最佳蛋白质需要量推荐水平分别为:18℃:32%~35.45%,23℃:34%~36.49%,28℃下为36%~37.12%
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