PCR基因芯片上荧光PCR反应的研究

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目的:确定以后用于不同方面的荧光PCR反应能否在芯片上侧顺利进行,能否正确检测到其荧光变化.并分析在芯片上进行PCR反应及其反应时间的变化.比较在芯片上不同类型的荧光PCR反应的优点与缺点.方法:设计并制作以硅片为材料的PCR基因芯片.利用SSCP的方法筛查一例X连锁遗传性铁幼粒细胞贫血家系的基因突变并测序确定,设计检测此点突变的Taqman探针进行荧光PCR反应,在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.利用4步位点特PCR结合SYBR荧光染料初筛HLAA2,并在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.设计检测HLA-G9密码子多态性的分子信标进行荧光PCR反应.改变在芯片上荧光PCR反应的条件,并观察结果变化.结论;Taqman荧光PCR反应能够在PCR基因芯片上顺利进行,适用于芯片检测点突变与单核苷酸多态性.SYBR荧光PCR反应能够在PCR芯片上应用,适用于检测肿瘤融合基因.在芯片上进行PCR反应要求反应时间较常规PCR短.
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