金复康有效组分重楼皂苷Ⅶ抑制肺癌循环肿瘤细胞转移的作用及机制研究

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目的本研究旨在“扶正治癌”观点指导下,丰富对“伏毒”循环肿瘤细胞的生物学特征的认识,基于金复康口服液中的主要有效物质,筛选有效的抗癌中药单体组合;探讨重楼皂苷Ⅶ与葫芦巴碱、麦冬皂苷D、黄芪甲苷Ⅳ、绞股蓝皂苷等不同比例组合抑制循环肿瘤细胞增殖的作用;探索重楼皂苷Ⅶ抑制肺癌转移的作用机制。方法1.采用CCK-8细胞增殖实验,检测金复康中有效的中药单体,以重楼皂苷Ⅶ为主药,与不同比例的葫芦巴碱、麦冬皂苷D、黄芪甲苷Ⅳ、绞股蓝皂苷等组合,对肺癌循环肿瘤细胞(CTC-TJH-01)增殖的影响,筛选最佳中药单体组合。2.通过细胞迁移实验、细胞侵袭实验观察重楼皂苷Ⅶ对CTC-TJH-01细胞迁移及侵袭的影响。3.通过失巢凋亡实验观察重楼皂苷Ⅶ对CTC-TJH-01细胞失巢凋亡的作用,通过Western blot实验检测重楼皂苷Ⅶ抑制CTC-TJH-01细胞转移的分子机制。结果1.重楼皂苷Ⅶ为主药,不同比例分别组合葫芦巴碱、麦冬皂苷D、黄芪甲苷Ⅳ、绞股蓝皂苷等,结果各单体组合对CTC-TJH-01细胞的增殖抑制均不具有协同作用(p>0.05)。2.重楼皂苷Ⅶ可呈剂量依赖性的抑制CTC-TJH-01细胞的迁移(p<0.05);重楼皂苷Ⅶ可呈剂量依赖性的抑制CTC-TJH-01细胞的侵袭(p<0.05)。3.重楼皂苷Ⅶ可呈剂量依赖性的诱导CTC-TJH-01细胞发生失巢凋亡(p<0.05)。4.重楼皂苷Ⅶ干预CTC-TJH-01细胞后可下调CTC-TJH-01细胞上BDNF、Trk B、PI3K、p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白的表达(p<0.05)。结论1.各单体组合对CTC-TJH-01细胞的增殖抑制均不具有协同作用。2.重楼皂苷Ⅶ通过诱导CTC-TJH-01细胞失巢凋亡抑制肺癌细胞的迁移和侵袭。3.重楼皂苷Ⅶ通过BDNF/Trk B-PI3K/Akt通路抑制CTC-TJH-01细胞转移。
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