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背景:妇女进入围绝经期,由于体内雌激素的锐减,心血管功能发生明显变化,特别是动脉粥样硬化症(atherosclerosis,AS)的发病率逐渐接近男性。虽然部分临床及基础研究结果显示雌激素对于绝经后妇女的心血管功能具有一定的保护作用,然而根据2002年WHI一项激素替代疗法(HRT)试验的中期试验结果,已不再将心血管病的预防作为HRT的适应证。因此开发我国国粹—中药可能成为治疗围绝经期病症的有效途径。近年来, 脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)引起了医学界的广泛注意,尤其是其抗衰老作用越来越引起人们的重视。适当补充DHEA对于延缓衰老,改善与衰老相关的疾病,如改善心血管和免疫功能,变得尤为重要。目的:本实验通过建立去势雌兔动脉粥样硬化模型,探讨雌激素、DHEA以及补肾宁心中药复方对去势雌兔动脉粥样硬化的形成、体内其他器官如肝脏、子宫以及免疫功能的影响。同时建立血管内皮细胞体外损伤模型,进一步研究雌激素、DHEA以及补肾宁心中药血清对血管内皮细胞损伤的保护作用;以及雌激素、DHEA和补肾宁心方中药血清对内皮-单核细胞之间相互作用的影响及其作用机制,拟为中西医结合防治女性绝经后动脉粥样硬化提供实验依据。方法:利用动物实验、原代细胞培养、流式细胞仪、扫描和透射电镜、酶联免疫吸附法、免疫组织化学及半定量的逆转录-聚合酶链反应等多种方法对雌激素、DHEA以及补肾宁心中药复方对去势雌兔动脉粥样硬化形成、体内其他器官如肝脏、子宫和免疫功能的影响以及对血管内皮细胞损伤的保护作用、对内皮-单核细胞之间相互作用的影响进行了体内与体外的研究。结果:(1 )与未用药的去势对照组相比,雌激素可降低去势雌兔血清甘油三酯(TG)水平,但对血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)无明显影响。DHEA和补肾宁心中药复方对去势雌兔血脂无明显影响。(2)雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA干预后动物的<WP=7>主动脉粥样硬化斑块面积与内膜面积比值,内膜中膜厚度比、面积比显著低于未用药的去势对照组;雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA均能显著减轻主动脉病理损害,降低血管内皮细胞血管细胞粘附分子(VCAM-1)的表达。(3)与未用药的去势对照组相比,雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA均可显著升高血清NO水平。(4)动物去势后血清雌二醇水平明显下降;苯甲酸雌二醇可显著升高去势雌兔血清雌二醇水平;补肾宁心方无影响,而DHEA可略微升高去势雌兔血清雌二醇水平。苯甲酸雌二醇显著下调血管内皮细胞雌激素受体的表达,补肾宁心中药复方或(和)DHEA可上调雌激素受体表达水平。(5)经雌激素作用后,去势雌兔子宫内膜增生明显,而DHEA以及补肾宁心中药复方对子宫内膜无明显影响。(6)与去势对照组相比,雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA均可减轻肝脏的脂肪沉积。(7)补肾宁心方,尤其是DHEA对去势雌兔的免疫功能有促进作用,且使脾脏免疫活性细胞在mRNA转录水平,由Th2型(IL-10) 向Th1型(IL-2)偏移;而雌激素无此作用。(8)建立血管内皮细胞损伤模型,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)显著抑制内皮细胞合成NO、促进丙二醛生成并促进内皮细胞凋亡;显著升高内皮细胞条件培养基中MCP-1含量,同时ox-LDL显著增强单核U937细胞与内皮细胞之间的相互粘附,明显促进内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1以及E-选择素的表达,且在内皮细胞条件培养基作用下单核U937细胞CCR2、LFA-1以及VLA-4mRNA水平明显升高。如在试验体系中加入雌激素、DHEA或灌服补肾宁心方的动物血清, 则内皮细胞NO合成增多、丙二醛生成减少,内皮细胞的凋亡率下降;同时内皮细胞条件培养基中MCP-1含量下降,单核U937细胞与内皮细胞粘附率明显下降,内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1或E-选择素的表达下调;且在条件培养基作用下单核U937细胞CCR2、LFA-1以及VLA-4mRNA水平明显下调。结论:(1)补肾宁心中药复方以及脱氢表雄酮均可减轻动脉粥样硬化早期病理改变,预防和减少动脉粥样硬化的形成。(2)脱氢表雄酮以及补肾宁心方含药血清具有抑制炎症的作用,通过抑制内皮细胞分泌MCP-1,降低内皮细胞表面粘附分子ICAM-1、VCAM-1的表达从而下调单核细胞相应受体CCR2、LFA-1以及VLA-4的表达,阻止内皮细胞对单核细<WP=8>胞的趋化以及之间的相互粘附,保护内皮细胞,延缓动脉粥样硬化的发生发展。(3)补肾宁心中药复方尤其是DHEA对去势雌兔的免疫功能有促进作用,且使脾脏免疫活性细胞的细胞因子转录由Th2 向Th1偏移。DHEA与补肾宁心中药复方合并使用,对血管内皮细胞损伤的具有保护作用,对防治围绝经期妇女动脉粥样硬化症的发生与发展具有积极意义。