巴豆酰化修饰是在巴豆酰基转移酶作用下将巴豆酰基从巴豆酰-辅酶A转移到赖氨酸残基上的一种新型翻译后修饰。其它实验室及我们实验室的研究表明,乙酰基转移酶CBP/p300可以催化组蛋白巴豆酰化,组蛋白去乙酰化酶HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC8以及SIRT1也具有组蛋白去巴豆酰化酶活性。我们用小鼠的胚胎干细胞CGR8为材料,体外诱导分化形成拟胚体,检测组蛋白乙酰化和巴豆酰化水平发现胚胎干细胞分化后组蛋白乙酰化修饰和巴豆酰化修饰水平明显下降。为了研究巴豆酰化修饰在胚胎干细胞中的作用,我们的策略是利用实验室前期筛选得到的具有去巴豆酰化但丧失了去乙酰化酶活性的HD AC1突变体(HDAC1-VRPP),在胚胎干细胞中选择性降低组蛋白巴豆酰化修饰。因此我们在小鼠胚胎干细胞CGR8中构建了可诱导表达野生型HDAC1和突变型HDAC1-VRPP的稳系。我们通过蛋白印迹方法和RT-PCR方法分别检测了Dox诱导野生型HDAC1和突变型HDAC1-VRPP表达不同时间对胚胎干性因子Oct4、Sox2和Nanog蛋白水平的影响和不同胚层的标记基因在转录水平的变化,发现诱导野生型和突变型的HDAC1都能导致胚胎干性因子蛋白水平的下降和分化标志基因表达不同程度的上调,表明选择性去巴豆酰化修饰诱导胚胎干细胞分化。通过显微镜观察,我们也证实了 Dox诱导表达HDAC1-WT及HDAC1-VRP P九天后胚胎干细胞的克隆团形成明显变小。以上结果表明胚胎干细胞具有相比分化细胞而言更高水平的组蛋白巴豆酰化修饰,并且发现高水平的组蛋白巴豆酰化修饰对维持胚胎干细胞的干性具有重要作用。