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斑玉蕈是一种备受国内外市场亲睐的食、药兼用的珍稀名贵食用菌，是我国工厂化推广栽培的重要食用菌品种之一。随着斑玉蕈产业的快速发展，生产上迫切需求具有优良性能的斑玉蕈新品种来替代现有品种，充分发挥斑玉蕈新品种的增效作用显得尤为重要。本研究充分利用分子标记技术与原生质体单核化技术，对斑玉蕈进行杂交选育，经过出菇实验以及分子标记验证，准确鉴定杂交菌株与亲本菌株的遗传差异，成功选育出具有优良性能的斑玉蕈新品种。主要研究结果如下：1斑玉蕈种质资源鉴定及杂交亲本选择：利用RAPD、ISSR和SRAP标记技术，共筛选到15个RAPD随机引物、5个ISSR随机引物和10对SRAP随机引物对16个斑玉蕈菌株进行综合分析，通过NTSYSpc2.1生物软件计算出16个斑玉蕈菌株两两间的遗传相似系数（Gs）范围为0.566~0.922，两两间的遗传距离范围为0.078~0.434，平均遗传相似系数为0.738，聚类分析结果表明，16个菌株在0.68~0.93间有不同程度的聚合，当Gs=0.73时，可分为6大类群：第Ⅰ类群：SM白玉、白玉、19C；第Ⅱ类群：2A、真9600、18C、ⅢM1、海鲜菇、蟹味菇、真9602；第Ⅲ类群：真01；第Ⅳ类群：I4CF1、I2CF1、真姬菇515；第Ⅴ类群：灰蟹菇；第Ⅶ类群：灰白。在以上聚类分析的基础上，综合经济性状评判，白玉和灰蟹菇都有在工厂中进行大规模生产栽培应用，因此，选择白玉和灰蟹菇作为杂交实验的亲本菌株。2杂交育种：对以上两亲本通过原生质体单核化技术获得了白玉单核菌株2株，灰蟹菇单核菌株13株，单核获得率分别为4.1%和9.56%。将白玉单核菌株与灰蟹菇单核菌株进行杂交配对，获得斑玉蕈杂交菌株12株。通过出菇实验发现，杂交菌株：白13-49、白55-25、白55-4、白55-51及白55-6的栽培周期73d，比亲本栽培周期缩短了7d，在子实体形态上差异显著，充分表现了两亲本的互补性状，其菌盖色泽为浅黄色，菌盖直径介于两亲本之间；菌柄色泽为米黄色，菌柄长度略高于两亲本，菌柄粗细介于两亲本间；其平均瓶栽产量为53.19~65.13g，平均生物学效率88.7%~108%，表现出很强的杂种优势,由此说明斑玉蕈的原生质体单核化杂交育种技术是可行有效的，具有较好的实用价值。3杂交菌株的分子标记验证：利用RAPD标记技术对出菇实验筛选到的5株优良性状的菌株：白13-49、白55-25、白55-4、白55-51及白55-6进行分子标记鉴定，PCR扩增图谱相似指数分析，5株菌株扩增的DNA条带中不仅具有双亲所共有的条带，还兼有双亲中任一亲本所特有的条带，以上5个菌株与白玉亲本的相似指数都为80.3%，与灰蟹菇亲本的相似指数分别为：83.5%、79.3%、81.0%、81.0%、79.4%，说明5株菌株为杂交菌株，白55-4、白55-51、白55-6三株菌株间的遗传相似指数为100%，表明该3株菌株为同一菌株，因此，本研究最终获得3株斑玉蕈新菌株。