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菌株B02为北京市农林科学院植保环保所植病生防室从北京郊区大田分离到的一株拮抗菌,初步试验证明其对多种植物病原菌有很好的抑制作用,为了进一步研究其性质,首先对其进行了鉴定,通过一系列的生理生化试验及形态观察,最终确定该菌为枯草芽孢杆菌。通过摇瓶发酵对株菌B02产生拮抗物质培养基进行了初步研究。单因素试验得到的最佳碳源为糊精,对玉米大斑病菌的抑菌圈直径达3.4cm,有机氮的筛选经过单因素试验并对其进行组合,得到的最佳氮源为牛肉膏和胰蛋白胨。最佳无机氮源为KNO3,NaCl对B02产生拮抗物质也有促进作用。无机离子对B02产素的影响很大,其中MnSO4和FeSO4的抑菌圈明显增大,而K2HPO4、K2HPO4与MgSO4的组合以及KH2PO4抑菌圈均小于对照,说明对B02产素反而有抑制作用。ZnSO4对B02产素影响不大。最后对各种成分做了一次均匀试验设计,得到最佳产素培养基为:糊精1.55%,牛肉膏2%,胰蛋白胨0.4%,NaCl1.15%, KNO31.15%, MnSO4 0.5%。B02的最适培养条件为温度30℃,过高或过低都不利于其产生拮抗物质,最适转速为200r/min,200转时的抑菌圈最大为3.0cm,但是在所选几个转速下抑菌圈大小区别不太明显,说明在所选转速范围内,转速对B02产素的影响不是很大。初始pH值在7-8之间最好,说明株菌B02在接近中性条件下最易产生拮抗物质,酸性或碱性过高都不利于B02产生拮抗物质。通气量对B02影响也很大,最好为500ml摇瓶装液50ml,在50ml/500ml条件下摇瓶的通气量较大,发酵液产生的抑菌圈也最大,在200ml/500ml时最小,说明在一定范围内装液量越少即通气量越大越有利于B02的产素。而接种量为5%时生长最好,最佳种龄为24h,最佳培养时间为72h。试验表明,碳、氮源、无机离子、发酵温度、时间、初始pH值及通气量等都对菌株B02分泌抗菌物质有明显影响。试验最终确定了B02产素的最适培养基和培养条件,为该菌株的进一步研究奠定了基础。