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在大肠杆菌中表达野生型和变异型重组人IL-13,经纯化复性获得具有生物学活性的蛋白,检测两种蛋白对人气道平滑肌增殖的影响,初步判断两种蛋白在哮喘气道重建中的作用。方法:用PGR扩增IL-13基因片段,用定点突变PCR获得其突变体(IL-13’)基因。将IL-13和IL-13’基因分别克隆至原核表达载体pET30a(+)中,构建重组体pET30a(+)IL-13(pETIL-13)和pET30a(+)IL-13’(pETIL-13’)。以重组体转化E.coliBL21(DE3)在IPTG诱导下进行表达。表达产物用Ni-NTA层析柱进行纯化。纯化产物用氧化还原谷胱甘肽系统透析复性后,检测其生物学活性。以人气道平滑肌(ASMC)为研究对象,将野生型和变异型人IL-13分别作用于ASMC,用MTT法检测ASMC的增殖。结果:在E.coliBL21(DE3)中表达了IL-13/IL-13’-His。融合蛋白。经Westernblot证实,为人儿-13。表达的融合蛋白以包涵体的形式存在,纯化后得到较高纯度的重组蛋白。复性后的包涵体检测具有生物学活性。MTT试验显示,野生型IL-13作用于ASMC后A值由0.588±0.013升高至0.668±0.015,变异型IL-13作用于ASMC后A值由0.588±0.013升高至0.698±0.012。结论:成功地获得具有生物学活性的野生型和变异型人儿-13重组蛋白,野生型和变异型IL-13均能促进ASMC的增殖,变异型儿-13的促增殖效应强于野生型。